基因药物课件.pptVIP

四、靶細胞1、造血細胞常用反轉錄病毒，體外基因轉移，彌散的組織多，分散廣。對轉入外源基因的細胞可檢驗，考慮安全性及有效性。2、肌肉細胞常用。肌肉細胞分佈廣，含量豐富，為“永久性”細胞，基因不會因分裂而丟失；細胞長而大，且為多核細胞，基因易轉移和表達。為“非生命”器官，安全；溶酶體少，外源DNA不易被降解，基因存活時間長；血流豐富，產物可釋放入血3、皮膚表皮塗抹或膚內注射裸露DNA活脂質體包裹DNA。安全、簡便，易行，但皮膚不斷更替。4、其他如肝細胞、靜脈注射等。五、轉移方法1、化學法DNA介導：用磷酸鈣微量沉澱外源DNA，然後與靶細胞混合。染色體介導：用秋水仙素處理使染色體固縮，破碎，差速離心，分離出染色體，與受體細胞混合。脂質體介導：臨床已用受體介導：外源DNA與某些細胞特異性受體的多肽配基形成複合物，與受體結合進入細胞2、物理法直接注射法，顯微注射法，電穿透法等3、病毒介導目前最常用和最成熟的方法六、基因治療的臨床試驗當前基因治療試驗：治療性試驗基因標記非治療性試驗治療性試驗1、遺傳性疾病2、惡性腫瘤（1）抑癌基因或細胞因數基因治療（2）自殺基因系統（3）抑制血管生成（4）反義藥物（5）導入MHCI類抗原基因（6）導入MDR1(MultidrugResistance)基因3、病毒性感染4、其他*全球在研的個基因治療試驗,分佈於28個不同的國家和地區。其中以美國的數量最多,共838項,占總量的65.3%,其次為英國150項,占總量的11.7%.我國目前臨床在研的基因治療專案有8個基因藥物一、基因治療的概念1、基因治療的定義:(P632頁)基因治療是將人的正常基因或有治療作用的基因導入人體靶細胞以糾正基因的缺陷或發揮治療作用，從而達到治療疾病目的的生物醫學新技術。而用於基因治療的核酸等稱為基因藥物（genemedicines）在未形成概念前，20世紀70年代就開始臨床實驗，由於實驗未取得成果，而且沒有得到NIH的批准，廣受抨擊。80年代，在動物身上進行了大量試驗，為其臨床應用奠定了基礎。1990年9月，臨床實驗正式開始。患者是一名患嚴重聯合免疫缺陷症的年輕姑娘，她從父母處各繼承了一個缺陷的ada基因，造成體內缺乏腺苷酸脫氨酶。我國復旦大學的薛京倫研究小組，做了世界上首例血友病Ｂ基因治療。成功地對先天性重症免疫缺陷症進行基因治療的法國基因治療組組長艾倫·費希爾博士（左）和成員瑪麗娜·卡巴甘那卡勃博士（右）。2002年10月,一名法國男孩在接受試驗性基因治療後罹患白血病，而基因治療很可能是白血病發病的原因。Fisher說，他非常希望這種基因治療方法從總體而言利大於弊。除基因治療之外，治療SCID的另一種治療方法是近親的骨髓移植。除非骨髓移植非常匹配，否則手術的失敗率是25%。他強調說，這一失敗率比現在接受基因治療的11例患者的併發症發生率高2倍以上。從基因角度：對缺陷的基因進行原位修復用正常有功能的基因置換有缺陷的基因增補缺陷基因（不需要去除異常基因，而是另外轉入與缺陷基因同源的有功能的基因來彌補缺陷的基因）從治療角度導入基因以改變患者細胞的基因表達導入基因：缺陷基因相對應的有功能的同源基因缺陷基因無關的治療基因基因治療的兩種形式體細胞基因治療種系基因治療只限於某一體細胞的基因的改變只限於某個體的當代對缺陷的生殖細胞進行矯正當代及子代2、基因治療的方式基因矯正或置換基因增補基因封閉其他3、導入的方式體外導入（exvivo）體外將基因導入細胞內再將這種基因修飾過的細胞回輸病人體內使這種帶外源基因的細胞在體內表達達到治療或預防的目的體內導入（invivo）外源基因直接導入體內有關的組織細胞使其進入相應的細胞並表達基因治療的基本程式治療性基因的選擇基因載體的選擇病毒載體非病毒載體靶細胞的選擇體細胞生殖細胞基因轉移間接體內療法直接體內療法外源基因表達的篩選利用載體中的標記基因回輸體內目前臨床試驗的治療基因：合適的能達到治療/預防的目的基因的cDNA目的基因的cDNA的獲得cDNA文庫中目的基因的克隆人工合成基因片段PCR法篩選擴增目的基因二、治療的基因的選擇三、載體系統--運送基因的工具病毒載體非病毒載體逆轉錄病毒載體腺病毒腺相關病毒單純胞疹病毒哺乳動物人工染色體脂質體裸DNA基因縫合線法