微生物选择培养与数量测定实验方案.pdfVIP

学习目标

研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定

学习重点

对土样的选取和选择培养基的配制。对分解尿素的细菌的计数。

学习难点

对土样的选取和选择培养基的配制。对分解尿素的细菌的计数。

课前预习

使用说明与学法指导

生物选修一专题二课题二

知识准备

搜集寻找目的菌的方法及鉴定

助读

1．筛选菌株

(1)中微生物筛选的原理：人为有利于生长的条件(包括营养、温度、

pH等)，同时或其他微生物生长。

(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时或其

他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。

（3）配制选择培养基的依据

根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基

中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养

的微生物，加入高浓度的食盐可选择培养金葡萄球菌等。

2．统计菌落数目

（1）测定微生物数量的常用方法有和。

（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理

当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，于样品稀释液中

的一个。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为

了保证结果准确，一般选择菌落数在

的平板进行计数。

3．设置对照

设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结

果的。例如：为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的

培养基作为空白对照。

4、实验设计

关于土壤中某细菌的分离与计数实验操作步骤如下：

⑴．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。应先3cm左右，再取样，

将样品装入事先准备好的中。

⑵．：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基

将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显选择

培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为，用来判断选择培养基是

否起到了选择作用。[

⑶．样品的和微生物的与观察

将10g土样加入盛有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250mL)，充分摇匀，吸

1

取上清液ml，转移至盛有ml的生理盐水的无菌大试管中，将土样以1、10、

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10……依次等比稀释至10稀释度，并按照由10～10稀释度的顺序分别吸取ml进

行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。将涂布

好的培养皿放在30℃温度下培养，及时观察和记录。挑选选择培养基中不同形态的菌落接

入含培养基的斜面中，观察能否产生如