高三一轮生物总复习-课下巩固检测练（十六）答案.docxVIP

课下巩固检测练(十六)生物技术与工程

一、选择题

1.解析：选B。合成DNA的原料是脱氧核苷酸，因此补充的原料应为四种脱氧核苷酸，A错误；引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，是一段RNA链，因此T7RNA聚合酶催化合成的产物包含mRNA和引物，B正确；若环状DNA携带DNA酶基因，其表达产物会水解DNA，因此环状DNA还应携带启动子、终止子和复制原点序列等，不携带DNA酶基因，C错误；两条子链延伸的方向都是5′→3′，解旋酶沿环状DNA的移动方向与一条子链延伸方向相同，与另一条子链延伸方向相反，D错误。

2.解析：选C。基因表达载体构建过程中需要限制酶和DNA连接酶两种酶处理，A正确。据图可知，小鼠有编码红、黄、蓝荧光蛋白的基因，前端有脑组织特异性表达的启动子，肌肉细胞不会表达颜色基因，故若小鼠细胞含一个表达载体T(不含Cre酶)，其肌肉组织细胞呈无色，B正确。loxP1、loxP2位置如图2黑白三角符号所示，两个loxP1或两个loxP2之间的基因最多会被Cre酶敲除一次，将含Cre酶的病毒注入小鼠体内，Cre酶表达情况不同，识别的loxP不同，则有可能未敲除荧光蛋白基因，此时为红色(同不含Cre酶时)；也有可能敲除两个loxP1之间的红色荧光蛋白基因，此时为黄色；也有可能敲除两个loxP2之间的红色和黄色荧光蛋白基因，此时为蓝色，因而不同脑组织细胞会差异表达红色、黄色或蓝色荧光蛋白基因，C错误。小鼠脑组织细胞内有2个相同表达载体T(含Cre酶)，Cre酶对每个DNA片段随机剪切，因而细胞的颜色由细胞内两种荧光蛋白的颜色叠加而成，故其脑组织细胞可能出现两种颜色，D正确。

3.解析：选B。由于引物只能引导子链从5′端到3′端合成，根据碱基互补配对原则，其中一个引物序列为5′-TGCGCAGT-3′，A正确；根据三种酶的酶切位点，左侧的黏性末端是用NheⅠ切割形成的，右边的黏性末端是用CfoⅠ切割形成的，B错误；用步骤①的限制酶对质粒进行切割，即使用NheⅠ和CfoⅠ进行切割，根据它们的识别位点以及原本DNA的序列可知，切割之后至少获得2个片段，C正确；图中形成的是黏性末端，可用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶连接限制酶切割后的目的基因片段和质粒，D正确。

4.解析：选D。据图可知，Ers1基因的转录方向由左向右，质粒中限制酶HpaⅠ靠近启动子，限制酶XhoⅠ靠近终止子，若要将Ers1基因反向连接到质粒中，则需在Ers1基因左右两端分别添加限制酶XhoⅠ、HpaⅠ的识别序列，A正确。基因表达载体中含有潮霉素抗性基因，筛选农杆菌的培养基中可加入潮霉素；受体细胞经脱分化和再分化后形成转基因植株，因此过程④包括脱分化和再分化，B正确。反义Ers1基因转录的模板链和Ers1基因的模板链互补，因此，反义Ers1基因和Ers1基因分别转录出的mRNA碱基序列能互补，C正确。农杆菌侵染植物细胞后，其中的T-DNA转移至植物的染色体上，依题意，LB、RB分别为T-DNA的左、右边界，标记基因Kanr不在T-DNA上，hyg在T-DNA上，因此，若目的基因成功转入植物细胞中，且相关基因都能正常表达，也只能检测到hyg的表达产物，D错误。

二、非选择题

5.解析：(1)构建重组质粒的过程中，为了将双链DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，需要使用E.coliDNA连接酶。为了将目的基因EGFP插入到质粒启动子CadR和终止子之间，故应用MunⅠ和XhoⅠ切割质粒，以保证质粒和目的基因的高效重组。(2)EGFP基因模板链的3′端应与启动子靠近，利用PCR技术获取EGFP基因时，为保证EGFP基因能正确插入载体且可以正常表达，除选择引物P1外，还需要选择引物P2，引物P2和编码链部分序列相同，不能引入MunⅠ识别序列，因为目的基因中有这个限制酶的序列，应该引入EcoRⅠ的序列。利用同尾酶切割载体和目的基因所在片段，应在其5′端增加EcoRⅠ的识别碱基序列和起始密码子对应序列5′-GAATTCATG-3′。(3)通过琼脂糖凝胶电泳区分不同的DNA片段的原理是不同DNA分子的大小和构象不同，在凝胶中的迁移速率不同。非特异性条带产生的原因可能是温度过低导致引物与模板的结合位点增加，故可适当提高PCR中复性过程的温度以减少非特异性条带的产生。(4)目的基因是绿色荧光蛋白基因，且由于基因表达载体的构建过程中，基因将LacZ序列切除，所以菌落应呈现出白色，故若需进一步鉴定该生物传感器是否制备成功，可选取白色菌落，接种到含Cd的培养基上，观察是否有绿色荧光出现。

答案：(1)将双链DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键MunⅠ和XhoⅠ(2)P2GAATTCATG(3)不同DNA分子的大小和构