广东地区鹅源大肠杆菌的分离鉴定、耐药性及致病性研究.pdfVIP

摘要

摘要

鹅大肠杆菌病是由某些致病血清型或条件致病性大肠杆菌引起的传染病，是

家禽最常见的疾病之一。该病可感染各个生长阶段的鹅，其中雏鹅和种鹅多发。

雏鹅主要以败血症、纤维素性心包炎、纤维素性肝周炎等症状为主；种鹅以卵黄

性腹膜炎和输卵管炎等为主，俗称“蛋子瘟”。该病的传染性较强，可经水平传

播和垂直传播，给鹅养殖户带来严重的经济损失。大肠杆菌血清型众多，不同血

清型交叉保护作用弱，难以实现有效的疫苗防控，因而药物治疗仍是治疗该病的

主要手段。然而临床上同一药物长时间使用、乱用滥用抗菌药物等现象频发，导

致大肠杆菌多重耐药严重，药物治疗往往难以达到预期效果，这给该病的防控造

成困难。因此，本研究从病死鹅的肝脏、输卵管等组织进行细菌分离，对分离纯

化的387株鹅源大肠杆菌进行血清型分布、耐药情况、毒力基因分布及其致病性

研究，以期为广东地区鹅源大肠杆菌的防控提供参考依据。

在2015~2023年期间，由本实验室保存以及本研究于广东省肇庆、江门、汕

尾、佛山、阳江等地市鹅养殖场的疑似大肠杆菌病死鹅采集肝、输卵管、脑、关

节等组织病料进行细菌分离，共分离纯化387株鹅源大肠杆菌。通过平板凝集和

微量凝集相结合的方法对387株鹅源大肠杆菌进行O抗原血清型鉴定，共鉴定

出36种血清型，其中O65、O143、O6、O73、O127为广东地区优势血清型。

对有详细信息的2021.5~2023.12的243份病料的分离结果进行流行病学调查分

析，结果显示鹅源大肠杆菌在各个季度、各个生长阶段均有分布，其中雏鹅和种

鹅感染率较高；统计其混感情况，发现雏鹅的混感率较其他生长阶段高。

采用K-B法对387株鹅源大肠杆菌进行药物敏感性试验，结果显示：选取

的25种抗菌药物中，387株鹅源大肠杆菌仅对美罗培南、多黏菌素B两种抗菌

药物敏感，其余药物敏感率均在41%以下；对青霉素、阿莫西林、头孢唑啉、头

孢拉定、氨苄西林、链霉素、四环素、多西环素等9种抗菌药物严重耐药，耐药

率在90%以上。多重耐药统计结果显示99.22%的鹅源大肠杆菌分离株表现为2

重及以上耐药，其中7重耐药占比最高，为41.34%。耐药谱型高达314种，10

种及以上抗菌药物耐药有364株，占比94.06%。对7类抗菌药物的19种耐药基

I

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因进行检测，结果显示blaCTX-M、aadA1、aph(3)-1、qnrS、floR、tetA、sul2基因

检测率较高，携带率均达70.03%以上。对耐药表型与耐药基因符合率进行统计，

结果显示，其中bla基因、bla基因、bla基因和美罗培南、阿莫西林克

OXASHVSHV

拉维酸，aph(3’)-1基因与链霉素，tetA基因与四环素、多西环素，sul2基因与

复方新诺明，floR基因和氟苯尼考，mcr-1基因和多黏菌素的符合率均在80%以

上。

本研究对15种毒力基因进行检测，除stx2和ibeB基因未被检出外，其余

13种毒力基因均被检出。其中mat基因的检出率最高，为92.78%；其次是iucD、

iroN、iss、ETT2基因，分别为82.73%、73.71%、67.53%、59.54%；vat、hlyF、

ibeA基因检测率较低，分别为10.31%、3.35%、4.9%；进行毒力基因谱分析，

结果显示共有172种不同的毒力基因谱，其中携带毒力基因数量最多的菌株一共

携带了11种毒力基因，携带4种毒力基因及以上的菌株有322株，占比83.21%。

从携带优势毒力基因谱的菌株中筛选O65、O143、O6、O73优势血清型菌株，

共筛选出18株鹅源大肠杆菌对小鼠进行致病性试验，结果显示鹅源大肠杆菌的

致病性与血清型和携带毒力基因数量有一定的关系。选取的6株O65血清型菌

株均为中高致病性菌株，而O143、O73血清型中有60%(3/5）的菌株为中高致

病性，O6血清型中有50%(1/2)为中高致病性菌株。90.91%（10/11）携带5种毒

力基因以上的菌株具有高致病性，仅28.57%（2/7）少于5种毒力基因的菌株为

高致病性。选取O6