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2025年核酸检测实操试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20题）

1.采集口咽拭子时，拭子应在两侧咽扁桃体及咽后壁擦拭的次数为：

A.1-2次

B.2-3次

C.3-5次

D.5-7次

答案：C

2.核酸检测实验室生物安全二级（BSL-2）实验室的核心工作区域，人员进入时应穿着的防护装备不包括：

A.医用防护口罩（N95及以上）

B.一次性工作帽

C.护目镜或面屏

D.防水围裙

答案：D（防水围裙为样本处理区额外防护需求，非核心区必穿）

3.新冠病毒核酸检测样本保存温度要求中，24小时内检测的样本应保存于：

A.-20℃

B.4℃

C.室温（18-25℃）

D.-80℃

答案：B

4.实时荧光PCR扩增仪的温度校准周期通常为：

A.1个月

B.3个月

C.6个月

D.12个月

答案：C

5.进行核酸提取时，若使用磁珠法，洗涤步骤中乙醇残留过多会导致的最直接影响是：

A.扩增效率降低

B.样本交叉污染

C.提取时间延长

D.磁珠回收率下降

答案：A（乙醇残留会抑制PCR酶活性）

6.鼻拭子采集时，拭子进入鼻腔的深度应为：

A.1-2cm

B.2-3cm

C.3-4cm

D.至鼻尖到耳垂距离的1/2

答案：D（约4-5cm，具体以接触到鼻黏膜为准）

7.实验室接收样本时，发现样本管标签模糊无法识别，正确的处理流程是：

A.直接丢弃样本

B.联系采样人员确认信息后补标

C.自行推测样本信息并记录

D.继续检测并在报告中备注“标签模糊”

答案：B

8.核酸检测结果判读时，若阴性对照Ct值为30且有扩增曲线，可能的原因是：

A.引物探针浓度过高

B.实验室环境污染

C.样本量加样过多

D.扩增仪温度偏差

答案：B（阴性对照应无扩增或Ct40）

9.新冠病毒ORF1ab基因与N基因均为阳性时，正确的报告结论是：

A.新冠病毒核酸阳性

B.新冠病毒核酸可疑阳性

C.新冠病毒核酸阴性

D.需重复检测

答案：A

10.生物安全柜使用完毕后，需运行紫外线消毒的时间为：

A.10分钟

B.20分钟

C.30分钟

D.60分钟

答案：C

11.提取核酸时，若样本量为200μL，裂解液的推荐体积通常为：

A.100μL

B.200μL

C.500μL

D.1000μL

答案：C（裂解液体积通常为样本量的2-3倍以确保充分裂解）

12.扩增反应体系配置时，若将荧光探针误加为引物，可能导致的结果是：

A.Ct值提前

B.无扩增曲线

C.熔解曲线异常

D.内参基因阳性

答案：B（探针为标记荧光基团的寡核苷酸，误作引物无法引发扩增）

13.样本运输过程中，若冰袋完全融化且运输时间超过2小时，正确的处理方式是：

A.直接进行检测

B.离心后取上清检测

C.灭活后重新保存于4℃

D.视为无效样本并重新采集

答案：D（运输条件不符合要求可能导致核酸降解）

14.咽拭子采集时，被采集者出现刺激性咳嗽，采样人员应采取的防护措施是：

A.立即后退1米

B.暂停操作待其平复

C.加快采样速度完成操作

D.要求被采集者佩戴口罩后继续

答案：B（避免因咳嗽导致气溶胶扩散，需待被采集者稳定后再操作）

15.核酸提取仪每日使用前应进行的校准项目是：

A.加样针液面探测功能

B.磁珠吸附时间

C.离心转速

D.加热模块温度

答案：A（确保加样准确性）

16.实时荧光PCR反应中，内参基因的作用是：

A.验证样本核酸提取效率

B.区分不同病毒亚型

C.提高扩增灵敏度

D.缩短检测时间

答案：A（内参基因检测人源基因，用于判断样本是否有效）

17.实验室废弃物处理时，感染性废物应装入的垃圾袋颜色为：

A.黑色

B.黄色

C.红色

D.蓝色

答案：B

18.若某样本N基因Ct值为35，ORF1ab基因无扩增，内参基因Ct值为28，正确的处理是：

A.报告阴性

B.报告阳性

C.重复检测并排查污染

D.视为无效样本

答案：C（单靶标阳性需排除污染或样本降解）

19.核酸检测实验室分区中，扩增产物分析区（四区）的主要功能是：

A.样本接收与处理

B.核酸提取

C.PC