第十一章色谱基础.pptVIP

3）分配比k值可直接从色谱图中测得A．组分滞留因子Rs，由于固定相对组分有保留作用，所以usuB．又因为：C．因此，得到：分配比与保留时间关系*第30页，共68页，星期日，2025年，2月5日3．K(分配系数)与k(分配比)的关系：β称为相比率，它也是反映色谱柱柱型特点的参数。填充柱，β=6-3.5；对毛细管柱，β=60-600。4．选择因子α：色谱柱对A、B两组分的选择因子α定义如下：A为先流出的组分，B为后流出的组分。通过选择因子α把实验测量值k与热力学性质的分配系数K直接联系起来，α对固定相的选择具有实际意义。*第31页，共68页，星期日，2025年，2月5日注意：分配系数K分配比k及选择因子α的关系K或k反映的是某一组分在两相间的分配：而α是反映两组分间的分离情况！当两组分K或k相同时，α=1时，两组分不能分开；当两组分K或k相差越大时，α越大，分离得越好。也就是说，两组分在两相间的分配系数不同，是色谱分离的先决条件。α和k是计算色谱柱分离效能的重要参数！*第32页，共68页，星期日，2025年，2月5日小结：（1）色谱条件一定时，K或k值越大，则组分的保留值也越大。（2）两个组分的K或k值相等，则两个组分的色谱峰必将重合。（3）两个组分的K或k值差别越大，则相应的两色谱峰相距就越远。*第33页，共68页，星期日，2025年，2月5日例题某色谱柱,固定相体积为0.5mL,流动相体积为2mL.流动相的流速为0.6mL/min,组分A和B在该柱上的分配系数分别为12和18,求A、B的保留时间和保留体积。Tr=tm(k+1)k=K/βtm＝Vm/F0β=Vm/VsTr(A)=2/0.6*[(K*Vs/Vm)+1]=2/0.6*[(12*0.5/2)+1]=13.33minTr(B)=2/0.6*[(18*0.5/2)+1]=18.33minVr(B)=tr(A)*F0=13.33*0.6=8mlVr(A)=tr(B)*F0=18.33*0.6=11ml*第34页，共68页，星期日，2025年，2月5日色谱理论色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动力学问题。影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效与分离度的评价指标及其关系。组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制.（组分和固定液的结构和性质）色谱峰变宽,色谱过程的动力学因素控制（两相中的运动阻力，扩散）两种色谱理论：塔板理论和速率理论；*第35页，共68页，星期日，2025年，2月5日二、峰间距、峰形状和峰宽的理论描述1．塔板理论（Platetheory）—柱分离效能指标 1952年，Martin等人提出的塔板理论将一根色谱柱当作一个由许多塔板组成的精馏塔，用塔板概念来描述组分在柱中的分配行为。塔板是从精馏中借用的，是一种半经验理论，但它成功地解释了色谱流出曲线呈正态分布。*第36页，共68页，星期日，2025年，2月5日塔板理论假定：1）塔板之间不连续；2）塔板之间无分子扩散；3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H；4）某组分在所有塔板上的分配系数相同；5）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入。当塔板数n较少时，组分在柱内达分配平衡的次数较少，流出曲线呈峰形，但不对称；当塔板数n50时，峰形接近正态分布。*第37页，共68页，星期日，2025年，2月5日塔板数n可用以评价一根柱子的柱效。色谱柱长：L，虚拟的塔板间距离：H,色谱柱的理论塔板数：n则三者的关系为：n=L/H理论塔板数与色谱参数之间的关系为：n越多，H越小、色谱峰越窄，则柱效越高。*第38页，共68页，星期日，2025年，2月5日2．有效塔板数有效塔板高度·计算出来的n和H值有时并不能充分地反映色谱柱的分离效能，因为采用tr计算时，没有扣除死时间tM，所以需引入有效塔板数和有效塔板高度表示柱效：*第39页，共68页，星期日，2025年，2月5日有关塔板理论的说明：1）说明柱效时，必须注明该柱效是针对何种物质、固定液种类及其含量、流动相种类及流速、操作条件等；2）应定期对柱效进行评价，以防柱效下降，延长柱寿命。3）塔板理论描述了组分在柱内的分配平衡和分离过程、导出流出曲线的数学模型、解释了流出曲线形状和位置、提出了计算和评价柱效的参数。*第40页，共68页，星期日，20