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解码荔枝特早熟奥秘：黄酮醇合酶基因的深度探究

一、引言

1.1研究背景

1.1.1荔枝产业现状与早熟品种的重要性

荔枝（LitchichinensisSonn.）作为无患子科荔枝属的常绿乔木，是热带和亚热带地区的特色水果，在我国已有两千多年的栽培历史。我国荔枝种植面积和产量均居世界首位，主要分布在广东、广西、海南、福建、四川、云南等地。然而，当前我国荔枝产业面临着品种结构不合理的严峻问题，中晚熟品种占比较大，早熟品种相对匮乏。这导致荔枝上市时间集中，市场竞争激烈，价格波动较大，果农收益难以保障。

在国际市场上，泰国、越南等国家凭借地理优势，生产早熟荔枝抢占市场先机。例如，泰国风花荔枝在1984年5月6日便空运销港，比广东三月红早近10天，销价为广东荔枝的1.6倍；2002年泰国早熟荔枝3月底至4月上中旬在广州上市，尽管品质较差，但每公斤销价仍高达40元。在国内市场，海南利用独特的生态条件发展早熟荔枝，其生产的三月红荔枝在2002年4月10日于广州天平架荔枝批发市场上市，每公斤价格30元，而广东南部地区5月1日上市的三月红每公斤20元，广州附近地区5月中旬上市的每公斤仅5-6元。这些都表明，早熟品种在市场竞争中具有明显的价格优势和市场竞争力。

早熟荔枝品种能够提前上市，填补市场空白，满足消费者对新鲜荔枝的需求，从而提高果农的经济效益。此外，发展早熟品种还有助于优化荔枝品种结构，缓解市场销售压力，促进荔枝产业的可持续发展。因此，选育早熟荔枝品种已成为当前荔枝产业发展的迫切需求。

1.1.2特早熟性状研究进展

荔枝特早熟性状的研究对于荔枝品种改良和产业发展具有重要意义。在遗传规律方面，有研究对极早熟荔枝自然授粉后代的性状进行观察分析，发现极早熟性与主干的粗度、抽秋梢时间存在一定相关性。后代主干粗度数值大多集中在母树附近，数值变化较大的株系通常表现相对迟熟；秋梢出现早、老熟快的植株表现为早熟，抽梢慢、老熟晚的植株表现为相对晚熟。同时，主干粗度与高度的比值也与成熟期有一致性，大部分植株的成熟期比母树早，少部分比母树晚，该比值可能与荔枝的早熟性相关。

在分子标记研究领域，科研人员已取得一定成果。以971、三月红为模板，从410个引物中筛选出14个稳定且有差异的随机引物，并对多个荔枝株系或品种进行RAPD分子标记分析，选出10个有差异的随机引物，通过聚类分析得到样品树状图，发现桂1-1、桂1-2的亲缘关系较近，然后与971、三月红的亲缘关系较近，初步推断这些引物可能与荔枝的极早熟性相关。此外，SSR分子标记也在荔枝研究中得到应用，为荔枝种质资源的遗传多样性分析、品种鉴定、分子标记辅助育种等提供了有力工具。

1.1.3黄酮醇合酶基因研究概况

黄酮醇合酶（FLS）是植物类黄酮合成途径中的关键酶，能够催化二氢黄酮醇生成黄酮醇。在其他植物中，对FLS基因的研究已取得诸多成果。在基因克隆方面，已从茶树、黑果枸杞、宁夏枸杞等多种植物中成功克隆出FLS基因。例如，从龙井43茶树叶片中通过RT-PCR获取目的基因，构建pET-28a重组表达载体，并实现目的蛋白高效诱导表达；利用转录组数据克隆黑果枸杞和宁夏枸杞黄酮醇合酶基因LrFLS及LbFLS，并对其进行序列分析和表达模式研究。

在功能验证方面，通过基因编辑、过表达等技术手段，深入探究FLS基因在植物生长发育、抗逆性、花色形成等方面的作用。在花色形成方面，研究发现FLS基因参与调控矮牵牛花瓣中黄酮醇的合成，进而影响花色的呈现；在植物抗逆性方面，FLS基因的表达与植物对干旱、高温等逆境胁迫的响应密切相关。这些研究为深入了解FLS基因的功能和作用机制提供了重要参考。

1.2研究目的与意义

本研究旨在初步探究荔枝特早熟性状相关候选基因黄酮醇合酶基因，通过对其进行克隆、序列分析和表达模式研究，揭示其在荔枝特早熟性状形成中的作用机制。这不仅有助于深入了解荔枝特早熟的分子机制，为荔枝早熟品种的选育提供理论依据，还能为利用分子标记辅助育种技术培育早熟优质荔枝新品种奠定基础，从而推动荔枝产业的品种结构优化和可持续发展。

此外，本研究结果还可能为其他果树特早熟性状的研究提供借鉴和参考，丰富果树遗传育种的理论和技术体系。通过挖掘和利用特早熟性状相关基因，有望缩短果树育种周期，提高育种效率，培育出更多适应市场需求的优良品种，满足消费者对多样化水果的需求，促进水果产业的健康发展。

二、材料与方法

2.1实验材料

本研究选用了特早熟荔枝品种“香蜜早”以及普通荔枝品种“黑叶”作为实验材料。“香蜜早”为茂名市电白区基于三月红改良的特早熟品种，其果头偏