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基于RNA/DNA共检测体系的法医学体液斑鉴定：技术革新与应用拓展

一、引言

1.1研究背景与意义

在法医物证学领域，犯罪现场遗留的体液斑是极为关键的证据。准确鉴定这些体液斑的来源，如判断是血液、唾液、精液还是其他体液，以及实现同一认定，即确定这些体液斑是否来自同一人，对于犯罪调查、案件侦破和司法审判都有着举足轻重的作用。

传统的体液斑鉴定方法，像基于理化性质或细胞形态学观察的预实验，以及免疫学检测，虽然操作相对简单，却存在诸多局限性。它们可区分的体液类型有限，而且种属特异性低，假阳性率高，难以满足现代犯罪调查对证据精准性和可靠性的严格要求。随着分子生物学技术的飞速发展，RNA/DNA共检测体系应运而生，为法医学体液斑鉴定带来了新的曙光。

DNA分析技术能够通过检测遗传标记来确定样本来源个体，在个体识别方面取得了显著成效。而RNA由于其组织特异性表达的特点，在体液类型鉴定上展现出独特优势。一些信使RNA（messengerRNA，mRNA）、微小RNA（microRNA，miRNA）等，在不同的体液中表达水平存在明显差异，可作为体液斑鉴定的候选分子标记。将RNA分析与DNA分析相结合的RNA/DNA共检测体系，既能利用RNA准确识别体液类型，又能借助DNA确定样本来源个体，大大提升了法医学体液斑鉴定的效能。

在性侵害案件中，准确鉴定犯罪现场遗留的精液斑或混合斑，对于确定犯罪嫌疑人、指控犯罪行为至关重要。通过RNA/DNA共检测体系，不仅可以确定精液斑的存在，还能进一步分析其来源个体的遗传信息，为案件侦破提供有力的证据支持。在一些复杂的犯罪现场，存在多种体液斑混合的情况，传统方法难以准确区分和鉴定，而RNA/DNA共检测体系能够有效应对这一挑战，准确识别不同的体液成分及其来源，为案件的调查和重建提供全面、准确的信息。

1.2国内外研究现状

国内外学者在RNA/DNA共检测体系在法医学体液斑鉴定中的应用方面开展了大量研究。在RNA分子标记的筛选与鉴定上，已经取得了丰硕成果。mRNA作为最早被研究的分子标记之一，研究者们依据人类转录组学信息，筛选出了一系列在特定体液中稳定表达的mRNA分子标记。例如，在精液中，精蛋白1(Protamine1，PRM1)、精蛋白2(Protamine2，PRM2)等mRNA的表达具有特异性，可作为精液斑鉴定的重要指标；在唾液中，富酪蛋白（Statherin，STATH）的mRNA表达较高，可用于唾液斑的识别。

对于miRNA分子标记的研究也在不断深入。SAUER等使用微阵列芯片技术，全面检测了miRBasev18.0中所有人类miRNA在体液中的表达情况，经过筛选和验证，确定了36个在不同体液样本间表达量差异显著的候选miRNA分子标记，为体液斑鉴定提供了更多的分子标记选择。

在检测技术方面，欧洲DNA分析组（EuropeanDNAProfilingGroup，EDNAP）和法医RNA分析组（ForensicRNAProfilingGroup，FoRNAP）成员实验室开展了一系列合作研究，基于毛细管电泳和高通量测序检测等技术，对mRNA分子标记的特异性和检测系统的灵敏度进行了广泛评估。一些法医学实验室还构建了适用于多种体液类型推断的mRNA复合检测体系，并将其应用于实际案件中，取得了良好的效果。

为了减少样品消耗、简化工作流程，一些研究组提出了RNA和DNA共同提取的方法。这些方法使得在对同一份样本进行RNA分析以识别体液类型的同时，还能进行DNA分析对检材来源进行个体识别，提高了检测效率和样本利用率。然而，目前的研究仍存在一些不足之处。生物检材中的mRNA稳定性较差，除了面临内源性降解之外，紫外线照射、高湿度与高温环境以及微生物等环境因素都会对其稳定性产生影响，导致在实际案件中，许多法医物证样本难以进行有效的mRNA表达分析。对于一些复杂样本，如高度降解或混合的体液斑，现有的检测技术和分析方法还不能完全满足精准鉴定的需求，需要进一步优化和改进。

1.3研究目的与创新点

本研究旨在深入剖析RNA/DNA共检测体系在体液斑来源鉴定和同一认定中的应用效果。通过系统地研究不同类型体液斑中RNA和DNA的特征，优化检测技术和分析方法，提高体液斑鉴定的准确性和可靠性，为法医学实践提供更为科学、有效的技术支持。

在检测技术上引入数字PCR技术。传统的PCR技术在定量分析上存在一定局限性，而数字PCR技术能够实现对核酸分子的绝对定量，具有更高的灵敏度和准确性。将数字PCR技术应用于RNA/DNA共检测体系中，能够更精准地