生物医药下游工艺员考试试卷与答案.docVIP

生物医药下游工艺员考试试卷与答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.蛋白质分离常用的色谱方法是（）

A.离子交换色谱B.气相色谱C.纸色谱

2.超滤的驱动力是（）

A.压力差B.浓度差C.电位差

3.以下哪种是常用的除菌过滤膜孔径（）

A.0.22μmB.0.45μmC.1μm

4.蛋白质结晶常用的方法是（）

A.蒸发结晶B.冷却结晶C.透析结晶

5.亲和色谱的配基与目标蛋白之间的作用是（）

A.共价键B.特异性结合C.范德华力

6.用于细胞破碎的方法是（）

A.离心B.超声破碎C.过滤

7.以下哪种缓冲液常用于蛋白质纯化（）

A.Tris-HClB.醋酸C.硫酸

8.离子交换色谱中，阴离子交换树脂吸附（）

A.阳离子B.阴离子C.中性分子

9.蛋白质复性常用的添加剂是（）

A.尿素B.蔗糖C.甘油

10.常用的冻干保护剂是（）

A.乙醇B.甘露醇C.丙酮

答案：1.A2.A3.A4.C5.B6.B7.A8.B9.C10.B

多项选择题（每题2分，共10题）

1.下游工艺中常用的分离技术有（）

A.离心B.过滤C.色谱D.蒸馏

2.影响蛋白质结晶的因素有（）

A.蛋白质浓度B.温度C.pH值D.离子强度

3.以下属于超滤优点的有（）

A.分离效率高B.可连续操作C.无相变D.设备简单

4.亲和色谱常用的配基有（）

A.抗体B.酶底物C.金属离子D.多糖

5.细胞破碎的方法包括（）

A.高压匀浆B.研磨C.化学法D.酶解法

6.蛋白质纯化过程中需要监测的指标有（）

A.蛋白质浓度B.纯度C.活性D.分子量

7.常用的色谱固定相有（）

A.硅胶B.葡聚糖C.琼脂糖D.纤维素

8.冻干过程包括（）

A.预冻B.升华干燥C.解析干燥D.冷却

9.蛋白质复性的方法有（）

A.稀释复性B.透析复性C.柱上复性D.超滤复性

10.离子交换色谱的洗脱方式有（）

A.改变离子强度B.改变pH值C.梯度洗脱D.等度洗脱

答案：1.ABC2.ABCD3.ABC4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABCD

判断题（每题2分，共10题）

1.超滤可以分离不同分子量的蛋白质。（）

2.亲和色谱的特异性很强，只结合目标蛋白。（）

3.细胞破碎后，所有蛋白质都能释放出来。（）

4.离子交换色谱中，洗脱液离子强度越大，蛋白质越容易被洗脱。（）

5.蛋白质结晶过程中，温度越低越好。（）

6.冻干后的产品便于长期保存。（）

7.复性后的蛋白质一定能恢复全部活性。（）

8.色谱分离中，固定相颗粒越小，分离效果越好。（）

9.过滤只能除去悬浮的固体颗粒。（）

10.离心转速越高，分离效果越好。（）

答案：1.√2.√3.×4.√5.×6.√7.×8.√9.×10.√

简答题（每题5分，共4题）

1.简述超滤的原理。

答案：超滤是在压力差驱动下，使料液中的溶剂和小分子溶质通过具有一定截留分子量的超滤膜，而大分子溶质被截留，从而实现分离的过程。超滤膜对不同大小分子的选择性透过，基于分子大小和形状差异进行筛分。

2.亲和色谱的优点有哪些？

答案：亲和色谱特异性强，能从复杂混合物中快速、高效分离出目标产物，纯度高。操作条件温和，对生物活性物质的活性影响小，且分离效率高、步骤简单，可有效节省时间和成本。

3.简述细胞破碎的目的。

答案：细胞破碎目的是使细胞内的目标产物释放出来，便于后续的提取和纯化。细胞有细胞壁和细胞膜保护，目标产物在胞内，破碎细胞才能打破屏障，让产物进入液相进行分离操作。

4.蛋白质复性的关键因素有哪些？

答案：关键因素包括复性缓冲液的组成，如合适的pH、离子强度；温度，过高或过低都影响复性效果；蛋白质浓度不宜过高，防止聚集；复性时间要合适，让蛋白质有足够时间正确折叠。

讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论在生物医药下游工艺中，如何选择合适的分离技术？

答案：要依据目标产物性质，如分子量、电荷、溶解性等。小分子可用超滤、色谱；带电物质选离子交换色谱。还要考虑起始物料组成，杂质多需多种技术联用。产量要求高时，选择可放大的技术。成本、设备条件等也需考虑，综合权衡选出最适宜技术。

2.阐述蛋白质结晶在生物医药下游工艺中的重要性。

答案：蛋白质结晶在下游工艺中重要性高。结晶可提高蛋白质纯度，去除杂质。晶体形态利于保存和运输。通过晶体结构解析能了解蛋白质三维结构，为药物研发、理解作用机制提供基础，助力生物医药产业发展。

3.分析在离子交换色谱中，影响蛋白质分离效果的因素。

答案：影响因素有固定相性质，不同离子交换树脂交换容量等不同；蛋白质电荷性质，与树脂结合能力不同。洗脱液离子强度和pH影响大，改变它们可改变蛋白质与树脂的作用。流速也关键，过快不利于平衡，影响分离度。

4.探讨下游工艺中，如何保证蛋白质产品的活性和稳定性。

答案