碳代谢阻遏对抗生素诱导细菌毒性与耐药性的影响研究.pdfVIP

摘要

抗生素的过度使用或不当使用造成的污染是环境和人类健康面临的一个重大问

题，进入环境的抗生素会抑制微生物的活性，特别是会产生和传播抗性基因

（antibioticsresistancegene，ARGs），对生态系统产生不利影响。环境中的能源物质

能够影响细菌的代谢，能够为细菌生长提供能量，因此是评估抗生素在环境中暴露的

不可忽视的因素。细菌在多种碳源共存下生长是环境中常见的条件，细菌在多种碳源

下能够优先利用一种碳源从而引起细菌碳代谢阻遏（carboncataboliterepression，

CCR)，以往的研究探究了葡萄糖对细菌耐药性的影响，而关于另一种常见重要碳源

果糖对细菌耐药性的影响研究较少。因此本研究以大肠杆菌作为模式生物，选择环丙

沙星（Ciprofloxacin，CIP）和2-甲基四氢呋喃-3-酮（2-Methyltetrahydrofuran-3-one，

MTHF）作为抗生素的代表，通过在常规培养基中MH（MuellerHinton）培养基和LB

（Luria-Bertani）培养基添加果糖，探究外加果糖引起的CCR对抗生素诱导大肠杆菌

毒性、接合转移和突变的影响，同时测定上述条件下影响细菌毒性和耐药性的关键指

标细胞膜通透性，并利用独立作用模型（Independentaction，IA）判别联合毒性（或

耐药性）的作用模式，利用交互效应计算抗生素与外加果糖引起的CCR对大肠杆菌

毒性、接合转移和突变的联合作用模式，主要结论如下：

1）外加果糖后引起细菌CCR影响了大肠杆菌的生长，大肠杆菌出现二次生长

现象；在MH培养基中，CIP毒性＞CIP+MTHF二元混合物毒性＞MTHF毒性；在外

加0-3.00g/L果糖的MH培养基中，CIP、MTHF和其二元混合物对大肠杆菌的毒性

均产生Hormesis效应，随着果糖浓度的升高，最大促进率逐渐增大，EC50逐渐增大。

2）在外加0-3.00g/L果糖的MH培养基中，CIP、MTHF和其二元混合物对大肠

杆菌的突变均产生Hormesis效应，随着果糖浓度的升高，最大突变频率促进率逐渐

增大；同时随着抗生素浓度的增加，细胞膜通透性增加。

3）在外加0-3.00g/L果糖的LB培养基中，CIP、MTHF和其二元混合物均发生

大肠杆菌RP4质粒接合转移，随着果糖浓度的升高，最大接合转移频率促进率逐渐

降低，当果糖浓度大于1.75g/L时，三种抗生素均抑制了大肠杆菌RP4质粒接合转

移；同时外加果糖降低了三种抗生素对大肠杆菌的细胞膜通透性。

综上所述，外加果糖激活细菌CCR通路，进而减弱了抗生素的细菌毒性，在促

进细菌耐药性产生风险的同时，降低了细菌耐药性传播的风险，为科学评估抗生素在

环境中多种碳源条件下的生态风险提供理论依据。

关键词抗生素；碳代谢阻遏；果糖；毒性效应；接合转移效应；突变效应

Abstract

Theoveruseorimproperuseofantibioticshasbecomeasignificantproblemforboth

theenvironmentandhumanhealth.Theintroductionofantibioticsintotheenvironmentcan

suppressmicrobialactivity,particularlyleadingtotheemergenceanddisseminationof

antibioticsresistancegenes(ARGs),thusposingadverseeffectsonecosystems.

Environmentalenergysourcescaninfluencebacterialmetabolismandprovideenergyfor

bacterialgrowth,makingthemacrucialfactorinassessingantibioticexposureinthe

environment.Bacteriacommonlygr