高效液相色谱及其应用.pptVIP

第1页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱简介高效液相色谱特点高效液相色谱分类高效液相色谱应用高效液相色谱发展第2页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱简介20世纪初：俄国植物学家茨维特提出经典液相色谱法。经典液相色谱法包括柱色谱、薄层色谱、纸色谱。20世纪60年代末：随着色谱理论的发展、高效细微固定相的开发、高压恒流泵及高灵敏度检测器的应用，高效液相色谱法得到了突破性的发展。第3页，共25页，星期日，2025年，2月5日第4页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱的特点高压：流动相流经色谱柱时，受阻力较大，为了迅速通过色谱柱，必须对流动相加高压。高效：分离效能高，柱效达2×103-5×104块/m。高灵敏度：最低可检测10-9g（ppb），痕量分析时可达10-12g(ppt)。应用范围广：约80%的有机物，特别是高沸点、大分子、热稳定性差的有机化合物。分析速度快：通常分析一个样品在15-30分钟，甚至有的样品在5分钟内即可完成，一般小于1小时。（三高一广一快）第5页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱法局限性成本高易污染环境缺少通用型检测器不能代替气相色谱，无法完成柱效高达10万块理论塔板数的分析不能代替中低压柱色谱法第6页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱分类吸附色谱法分配色谱法离子交换色谱法体积排阻色谱法按分离原理分类：正相色谱反相色谱第7页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相分析方法的建立收集样品信息，明确分析目的和要求选择样品制备方法确定分析模式，选择相应色谱柱确定检测方法和条件优化分离条件方法验证定量分析第8页，共25页，星期日，2025年，2月5日样品前处理技术高速离心过滤、超滤选择性沉淀萃取索氏抽提衍生化反应样品浓缩—旋蒸等新技术—加速溶剂萃取（ASE）第9页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱的应用食品工业中的应用在制药工业中的应用在环境监测中的应用在生物工程和生物化学中的应用在精细化工分析中的应用第10页，共25页，星期日，2025年，2月5日营养成份分析氨基酸、碳水化合物、维生素等食品添加剂防腐剂、香料、保鲜剂等有害成分兽药残留、农药残留等无机成份各种无机盐食品工业中的应用第11页，共25页，星期日，2025年，2月5日在制药工业中的应用药物鉴别如：青霉素中有效成份可用反相色谱法分离杂质检测（原料、中间体、副产物等）含量测定手性分离药物代谢动力学研究、临床血药浓度等检测中应用非常广泛第12页，共25页，星期日，2025年，2月5日在环境监测中的应用多环芳烃的检测（有机燃料未完全燃烧产生）多氯联苯（PCB）的检测农药残留的检测（有机磷、氯、除草剂等）酚类和胺类的检测（化工、燃料、制药等产生的工业废水）第13页，共25页，星期日，2025年，2月5日在生物工程和生物化学中的应用氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究变性高效液相色谱检测法（DHPLC）是近年来发展起来的一项相对较新的技术，主要应用于基因突变分析中，能够满足大规模的基因变异检测筛查。第14页，共25页，星期日，2025年，2月5日在精细化工分析中的应用醇、醛和酮、醚的分离分析酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究第15页，共25页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱的发展超高效液相色谱（UPLC）联用技术（LC-MS，LC-MS-MS)第16页，共25页，星期日，2025年，2月5日超高效液相色谱（UPLC）waters从上世纪60年代首推第一台液相色谱，到70年代液相色谱商业化，至2004年UPLC系统推出，一直是行业领导者。第17页，共25页，星期日，2025年，2月5日UPLC的特点超强分离能力（1.7um颗粒）超高速度（压力可达105MPa）超高灵敏度简便方便的方法转换快速自动进样（采用针内针）最佳的质谱接入口第18页，共25页，星期日，2025年，2月5日