酶的化学修饰课件.pptVIP

第四節結束點擊返回第五節蛋白質類及其它一．蛋白質類修飾二．金屬離子置換修飾一．蛋白質類修飾血漿蛋白質，其中人血清白蛋白應用較多常用方法1．戊二醛法：戊二醛雙功能基團2．碳二亞胺法：碳二亞胺作為交聯劑3．活性酯法：☆活性酯法-a白蛋白琥珀醯化活性酯法-b活性酯形成反應活性酯法-c修飾反應二．金屬離子置換修飾1．概念通過改變酶分子中所含的金屬離子，使酶的特性和功能發生改變的方法稱為金屬離子置換修飾。2．常用離子常用二價金屬離子。金屬離子置換修飾法只適用於本來在結構中含有金屬離子的酶舉例將鋅型蛋白酶的Zn2+除去，然後用Ca2+置換成鈣型蛋白酶，則酶活力可提高20-30%。若將鈣型蛋白酶製成結晶，則其酶活力比鋅型蛋白酶結晶的酶活力提高2-3倍。退出酶的化學修飾第一節前言一．酶的化學修飾原因1．穩定性不夠，不能適應大量生產的需要。2．作用的最適條件不符。3．酶的主要動力學性質的不適應。4．臨床應用的特殊要求。二．酶修飾的方向1．核酸水準2．蛋白質水準三．酶化學修飾的基本原理1．如何增強酶天然構象的穩定性與耐熱性2．如何保護酶活性部位與抗抑制劑3．如何維持酶功能結構的完整性與抗蛋白水解酶4．如何消除酶的抗原性及穩定酶的微環境第一節結束化學修飾原因酶修飾的方向基本原理穩定性不夠，不能適應大量生產的需要。作用的最適條件不符。酶的主要動力學性質的不適應。臨床應用的特殊要求。核酸水準蛋白質水準如何增強酶天然構象的穩定性與耐熱性如何保護酶活性部位與抗抑制劑如何維持酶功能結構的完整性與抗蛋白水解酶如何消除酶的抗原性及穩定酶的微環境第一節結束點擊返回第二節酶化學修飾的方法及修飾劑一．修飾劑的要求二．酶性質的瞭解三．反應條件的選擇四．酶修飾方法一．修飾劑的要求1．修飾劑的分子量、修飾劑鏈的長度對蛋白質的吸附性。2．修飾劑上反應基團的數目及位置。3．修飾劑上反應基團的活化方法與條件。二．酶性質的瞭解1．酶活性部位情況2．酶的穩定條件、酶反應最適條件3．酶分子側鏈基團的化學性質及反應活潑性等。三．反應條件的選擇1．反應體系中酶與修飾劑的分子比例。2．反應體系的溶劑性質，鹽濃度和pH條件。3．反應溫度及時間。四．酶修飾方法1．酶分子側鏈基團的化學修飾2．有機大分子對酶的化學修飾3．蛋白質類及其他。第二節結束修飾劑的要求酶性質的瞭解反應條件的選擇酶修飾方法第二節結束點擊返回第三節酶分子側鏈基團的化學修飾一．幾種重要的修飾反應二．特定氨基酸殘基側鏈基團的化學修飾三.研究新熱點一．幾種重要的修飾反應1．醯化及其相關反應2．烷基化反應3．氧化和還原反應4．芳香環取代反應二．特定氨基酸殘基側鏈基團的化學修飾1．巰基的化學修飾巰基具有很強的親核性，採用巰基化學修飾劑與酶蛋白側鏈上的巰基結合，使巰基發生改變，從而改變酶的空間構象、特性和功能。常用：烷基化劑、醯化基、馬來醯亞胺2．氨基的化學修飾3．羧基的化學修飾4．咪唑基的化學修飾5．胍基的化學修飾三.研究熱點-核酸類酶的修飾RNA酶的側連基團：指組成RNA的核苷酸殘基上的功能團。主要是核糖2’-位置上的羥基和嘌呤、嘧啶堿基上的氨基和羥基。第三節結束重要的修飾反應特定氨基酸殘基側鏈基團的化學修飾醯化及其相關反應烷基化反應氧化和還原反應芳香環取代反應巰基的化學修飾氨基的化學修飾羧基的化學修飾咪唑基的化學修飾胍基的化學修飾二硫基的化學修飾第三節結束點擊返回第四節有機大分子對酶的修飾一.概念利用水溶性大分子與酶結合，使酶的空間結構發生某些精細的改變，從而改變酶的特性與功能的方法稱為大分子結合修飾法，簡稱為大分子結合法。二．常使用的水溶性大分子修飾劑糖及糖的衍生物生物活性大分子具有生物活性的大分子物質第四節結束概念常用的水溶性大分子修飾劑舉例糖及糖衍生物：如聚乙二醇生物活性大分子：如肝素大分子多聚物：如乙烯酮精氨酸酶經聚乙二醇（PEG）結合修飾聚乙二醇對色氨酸酶進行修飾聚乙二醇結合修飾後的L-天門冬醯胺酶退出