酶工程制药课件.pptVIP

酶工程制藥第一節概述酶的特性酶是由活細胞產生的具有特殊催化功能的一類蛋白質。其特點：①催化效率高②專一性強③反應條件溫和④催化活性受到調節和控制一、酶工程簡介酶工程是酶學和工程學相互滲透結合發展而形成一門新的技術學科。它是從應用的目的出發研究酶、應用酶的特異性催化功能，並通過工程化將相應原料轉化成有用物質的技術。二、酶的來源三、酶的生產菌⒈對菌種的要求⒉生產菌的來源⒊目前常用的產酶微生物四、酶在醫藥領域的應用在疾病診斷方面的應用在疾病治療方面的應用在藥物生產方面的應用在分析檢測方面的應用第二節酶和細胞固定化一、固定化酶的製備⒈固定化酶的定義：固定化酶是指限制或固定於特定空間位置的酶，具體來說，是指經物理或化學方法處理，使酶變成不易隨水流失即運動受到限制，而又能發揮催化作用的酶製劑。⒉固定化酶的特點優點：具有生物催化劑的功能，又有固相催化劑的功能。①可多次使用②反應後，酶底物產物易分開，產物中無殘留酶，易純化，產品品質高。③反應條件易控制。④酶的利用效率高。⑤比水溶性酶更適合於多酶反應。缺點：酶活損失，成本增加，只能用於可溶底物和小分子底物，比菌體不適宜多酶反應和需要輔助因數的反應。⒊酶和細胞固定化方法酶和細胞固定化方法載體結合法交聯法包埋法網格型微囊型物理吸附法離子結合法共價結合法熱處理（細胞）⑴載體結合法①物理吸附法②離子結合法③共價結合法⑵交聯法⑶包埋法①網格型②微囊型⑷選擇性熱變性法⒋酶和細胞的固定化載體⑴吸附載體⑵包埋載體⑶共價結合載體二、固定化細胞的製備⒈固定化細胞的定義將細胞限制或定位於特定空間位置的方法稱為細胞固定化技術。被限制或定位於特定空間位置的細胞稱為固定化細胞。⒉固定化細胞的特點有細胞特性，生物催化劑功能，固相催化劑特點。優點：①無須進行酶的分離純化②保持酶的原始狀態，酶回收率高③比固定化酶穩定性高④細胞內酶附助因數可再生⑤細胞本身含多酶體系⑥抗污染能力強缺點：細胞內多種酶容易形成副產物，細胞膜、細胞壁和載體都存在著擴散限制作用；載體形成的孔隙大小影響高分子底物的通透性。⒊固定化細胞的製備技術⑴載體結合法是將細胞懸液直接與水不溶性的載體相結合的固定化方法。⑵包埋法將細胞定位於凝膠網格內的技術。⑶交聯法用多功能試劑對細胞進行交聯的固定化方法。⑷無載體法靠細胞自身的絮凝作用製備固定化細胞的技術。三、固定化方法與載體的選擇依據⒈固定化方法的選擇⑴固定化酶應用的安全性⑵固定化酶在操作中的穩定性⑶固定化的成本⒉載體的選擇四、固定化酶的形狀與性質⒈固定化酶的形狀⑴顆粒狀固定化酶⑵纖維狀固定化酶⑶膜狀固定化酶⑷管狀固定化酶⒉固定化酶的性質⑴酶活力的變化⑵酶穩定性的變化①操作穩定性②貯藏穩定性③熱穩定性④對蛋白酶的穩定性⑶酶學特性的變化①底物專一性②最適pH③最適溫度④米氏常數⑤最大反應速度3.固定化細胞的性質五、評價固定化酶的指標1.固定化酶活力的測定方法酶活力:在單位時間內單位體積中的底物減少量或產物增加量來表示。⒈分批測定法⒉連續測定法2.偶聯率及相對活力的測定第三節固定化酶和固定化

細胞的反應器一、反應器的類型和特點⒈間歇式攪拌罐反應器用於游離酶反應後隨即放料。⒉連續流動攪拌罐反應器連續進料、連續出料⒊填充床反應器固定化酶填充於床層內。反應器內的流體的流動形態為平推流形。底物以恒定流速通過反應床。⒋流化床反應器底物以足夠大的流速向上通過固定化酶床層，使固體顆粒處於流化狀態，達到混合的目的。⒌迴圈反應器部分反應液流出和新加入底物流入液混合，在進入反應床進行迴圈。⒍連續流動攪拌罐-超濾膜反應器⒎其他反應器各種反應器的示意圖二、反應器的選擇依據⒈根據固定化酶的形狀來選擇