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核心原则:无菌、轻柔、准确
整个操作过程必须严格遵守无菌原则,避免对母牛生殖道造成损伤和感染。
第一步:操作前准备
“工欲善其事,必先利其器”。充分的准备是成功的关键。
1.母牛的准备:
发情鉴定:?准确识别母牛的发情期是成功的前提。通常母牛发情持续12-18小时,排卵发生在发情结束后约12小时。最佳的输精时间是在发情中后期或站立发情结束后12小时左右。一个常见的经验法则是“上午发现发情,下午输精;下午发现发情,次日早晨输精”。
保定:?将母牛安全地保定在保定栏内,防止其乱动,保证操作者和母牛的安全。
清洁:?重点清洁母牛的外阴部。使用一次性纸巾,从里到外(从肛门方向向外)擦拭干净粪便和污物。必要时可用清水冲洗,但必须擦干。
2.器械和物品的准备:
液氮罐:?用于储存细管冻精。
细管冻精:?提前根据系谱或编号选择好优质冻精。
长臂手套:?一次性或可消毒的塑料长臂手套。
输精枪/输精管:?金属或塑料制,可重复使用,但必须彻底消毒。
输精枪套管/护套:?一次性塑料套,套在输精枪前端,避免污染。
细管剪刀:?用于剪断细管的封口端。
温水(35°C):?用于快速解冻细管冻精,通常放在保温杯里。
纸巾/毛巾:?用于擦拭和清洁。
75%酒精棉:?用于消毒输精枪和手部。
第二步:冻精的解冻与装枪
这个过程要求迅速、准确,避免精子受到冷休克或热应激。
提桶定位:?将液氮罐的提桶提升到罐颈下方,迅速找到所需细管,在罐内停留时间不要超过10秒。如果没找到,应将提桶放回,稍等片刻再寻找,以免浪费其他冻精和液氮。
水浴解冻:?从提桶中取出所需细管(通常为0.25ml或0.5ml),立即投入35°C的温水中,水浴解冻至少30秒(具体时间参照精液供应商的建议)。
擦拭消毒:?从温水中取出细管,用纸巾擦干表面水分。
装枪:
将输精枪内部推杆拉回。
将细管的棉塞端(钝端)?朝向输精枪内部。
将细管平稳地放入输精枪的槽内。
安装套管:?将一次性塑料套管拧在输精枪前端,确保密封。
剪口:?用细管剪刀在细管的封口端(尖端)?剪掉约0.5-1厘米,露出管腔。注意切口要平整。(注意:先装枪,后剪口,顺序不能错,以免污染精液。)
第三步:输精操作
这是整个流程的核心技术环节。
手臂消毒与润滑:?戴上长臂手套,用75%酒精棉擦拭手套,尤其是接触母牛的部分。然后涂抹少量水基润滑剂于手套上。
直肠把握法(核心技术):
清理肛门:?用手将母牛的尾巴拨到一侧,并用纸巾清洁肛门周围。
伸手入直肠:?五指并拢呈锥形,缓慢旋转进入母牛直肠。
清理宿粪:?将直肠内的粪便掏净,以免影响操作。如果直肠努责(收缩),可稍作停留,待其放松后再继续。
寻找并固定子宫颈:?这是最关键的一步。手在骨盆腔前沿可以摸到一个坚实、长条状、有软骨样感觉的器官,就是子宫颈。用手轻轻地将其握住并固定在手心。感觉就像握住一个稍硬的橡皮水管。
持枪与导入:
另一只手持输精枪,以避开污物的角度(约向上30度)将输精枪插入阴道。
让输精枪前端沿着阴道上壁滑入,直至碰到子宫颈口。
对接与穿入:
在直肠内手的引导下,将输精枪前端对准子宫颈外口。
通过直肠内的手,轻轻地、缓慢地将子宫颈前推,使输精枪仿佛是“被吸入”一样通过子宫颈的螺旋状褶皱。
关键技巧:?操作手法是“直肠内的手引导子宫颈套在输精枪上”,而不是用输精枪强行捅入。动作必须轻柔,避免损伤。
深部输精:?将输精枪穿过子宫颈,到达子宫体(即子宫角分叉处)即可。对于经验丰富的操作者,可以输到排卵侧的子-宫角深部(深部输精),效果更好。
注入精液:?确认输精枪到达正确位置后,缓慢地、平稳地将推杆推到底,将精液全部注入。整个过程约需3-5秒,太快可能造成精液倒流。
退出器械:?精液注入后,不要立即松开推杆,先将输精枪缓慢退出约10厘米,再松开推杆,最后完全退出。这样可以防止精液被带出。
第四步:操作后工作
母牛处理:?轻轻解除保定,让母牛安静休息。观察母牛有无异常反应。
器械处理:?立即清洗和消毒所有可重复使用的器械(如输精枪)。一次性物品(如手套、套管)应做无害化处理。
记录:?详细记录输精信息,包括:母牛耳号、输精日期、时间、所用冻精编号、操作员等。这对于后续的妊娠诊断和繁殖管理至关重要。
提高受胎率的关键要点
时机是关键:?准确的发情鉴定和适时输精是成功的首要因素。
卫生是保障:?严格的无菌操作能极大减少子宫炎症,而子宫炎症是导致不孕的主要原因之一。
技术是核心:?熟练的直肠把握技术,做到“轻、准、稳”,避免对生殖道造成任何损伤。
精液质量是基础:?确保使用的冻精来自健康的种公牛,且储存和解冻过程规范。
建议新手在经验丰富的技术员指导下进行多次练习,熟练掌握手感后再独立操作。
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