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病理科肿瘤病理诊断技术培训

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目录

01

基础理论概述

02

诊断技术方法

03

设备与试剂管理

04

案例分析与实践

05

质量控制体系

06

培训实施与评估

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基础理论概述

肿瘤病理学基本概念

良恶性肿瘤的鉴别

良性肿瘤生长缓慢、边界清晰、无转移，而恶性肿瘤具有侵袭性生长、异型性明显、核分裂象增多等特征，需结合组织学分级和临床行为综合判断。

癌前病变与原位癌

癌前病变（如不典型增生）具有恶变潜能，原位癌指上皮内瘤变未突破基底膜，早期识别可显著改善患者预后。

肿瘤的定义与本质

肿瘤是机体细胞异常增殖形成的肿块，其本质为基因突变导致的细胞周期调控失常，表现为自主性生长、浸润和转移等生物学行为。病理学通过组织形态学、免疫组化和分子检测等手段明确其性质。

03

02

01

常见肿瘤分类与特征

包括鳞癌、腺癌等，鳞癌以角化珠和细胞间桥为特征，腺癌则形成腺管结构并分泌黏液，常见于肺、胃等器官。

上皮源性肿瘤

如肉瘤（骨肉瘤、脂肪肉瘤），细胞呈梭形或星形，间质丰富，易血行转移，诊断需结合免疫组化（如SMA、CD34）。

如类癌和小细胞癌，表达Syn、CgA等标志物，具有分泌激素功能，临床可伴副肿瘤综合征。

间叶组织肿瘤

淋巴瘤（霍奇金与非霍奇金）以淋巴结结构破坏和异型淋巴细胞增殖为特点，需通过流式细胞术和基因重排检测分型。

血液系统肿瘤

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03

神经内分泌肿瘤

通过HE染色观察细胞排列、核浆比、核分裂等指标，结合组织构象（如巢状、梁状）判断肿瘤分化程度和起源。

利用特异性抗体（如CK7/CK20、ER/PR）进行肿瘤标记，辅助鉴别诊断（如乳腺癌Luminal型与三阴性型）。

通过FISH、PCR等技术检测基因突变（如EGFR、BRAF）、微卫星不稳定性（MSI）等，指导靶向治疗和预后评估。

诊断需涵盖肿瘤部位、大小、组织学类型、分级、浸润深度、切缘状态及分子特征，确保临床治疗决策的准确性。

病理诊断核心原理

组织学形态分析

免疫组化技术应用

分子病理学检测

病理报告规范化

02

诊断技术方法

组织学切片技术

通过脱水、透明、浸蜡等步骤将组织样本包埋于石蜡中，再用切片机切成微米级薄片，确保组织结构完整性和染色清晰度。

石蜡包埋与切片制备

利用低温冷冻组织并快速切片的技术，适用于术中快速病理诊断，需严格控制冷冻速度和切片厚度以避免冰晶伪影。

冰冻切片快速诊断

如HE染色、Masson三色染色等，用于突出显示特定组织成分（如胶原纤维、黏液等），辅助鉴别肿瘤类型和分化程度。

特殊染色技术

抗体标记与抗原修复

联合多种抗体标记（如PD-L1、Ki-67、HER2等），在同一组织切片上实现多靶点检测，为精准分型和预后评估提供依据。

多重免疫组化分析

自动化染色平台应用

采用全自动免疫组化仪标准化操作流程，减少人为误差，提高染色重复性和结果可比性。

通过特异性抗体结合肿瘤标志物（如CK、EMA、CD20等），并采用热修复或酶修复技术暴露被掩盖的抗原表位，提高检测灵敏度。

免疫组化应用

分子检测技术

03

微卫星不稳定性（MSI）检测

通过PCR或免疫组化评估错配修复蛋白表达，辅助诊断林奇综合征和预测免疫治疗疗效。

02

二代测序（NGS）

高通量检测肿瘤相关基因突变（如EGFR、KRAS、BRAF等），全面分析肿瘤驱动突变和耐药机制，指导个体化治疗。

01

荧光原位杂交（FISH）

检测基因扩增（如HER2）、缺失（如1p/19q）或易位（如ALK融合），为靶向治疗提供分子水平依据。

03

设备与试剂管理

显微镜操作规范

环境与安全控制

保持显微镜室湿度在40%-60%范围内，避免电路受潮短路。操作时佩戴防静电手套，减少样本污染风险。

操作流程标准化

严格按照低倍到高倍的顺序调焦，避免样本与物镜碰撞。油镜使用后需立即用二甲苯擦拭镜油，防止树脂固化损伤镜头。

光学系统校准与维护

定期检查物镜、目镜和聚光镜的光学性能，确保成像清晰度与对比度，避免因镜片污染或偏移导致诊断误差。使用后需用专业镜头纸清洁镜片，并关闭光源以延长灯泡寿命。

01.

试剂选择与储存标准

抗体试剂验证

优先选择经FDA或CE认证的一抗/二抗试剂，每批次需进行阳性/阴性对照测试，确保免疫组化染色特异性。开封后标注有效期，避免交叉污染。

02.

危险化学品管理

甲醛、二甲苯等有毒试剂须存放于防爆柜，双人双锁管控。使用通风橱操作，配备应急洗眼器和吸附棉。

03.

冷链试剂保存

RNA保存液、酶制剂等需-20℃冷冻储存，运输过程使用干冰维持低温链。定期检查冰箱温度记录仪，偏差超±2℃时启动应急预案。

样本处理设备使用

全自动脱水机校准

每月运行空载程序检测乙醇、二甲苯置换效率，蜡块浸润阶段温度需稳定在60±1℃，防止组织过硬或过脆。