L-丝氨酸(L-Serine)ELISA试剂盒说明书-赛拓森生物 - 竞争法.pdfVIP

酶联免疫吸附测试EnzymeLinkedImmunosorbentAssay

L-丝氨酸(L-Serine)酶联免疫(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用，不得用于临床诊断规格：96T

实验目的：

本试剂盒用于测定测定相关液体样本中L-丝氨酸(L-Serine)的含量。

实验原理：

本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中L-丝氨酸(L-Serine)水平。用纯化的L-丝氨酸(L-Serine)抗

体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入L-丝氨酸(L-Serine)，和HRP标记的L-

丝氨酸(L-Serine)抗原，使它们竞争结合，，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。样本颜色的深浅和样

品中的L-丝氨酸(L-Serine)的含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通

过标准曲线计算样品中L-丝氨酸(L-Serine)的含量。

试剂盒组成：

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶标准品S1（12μmol/L）0.5ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8标准品S2（6μmol/L）0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条标准品S3（3μmol/L）0.5ml×1瓶

4显色剂A液6ml×1瓶标准品S4（1.5μmol/L）0.5ml×1瓶

5显色剂B液6ml×1瓶标准品S5（0.75μmol/L）0.5ml×1瓶

6终止液6ml×1/瓶9说明书1份

7样品稀释液6ml×1/瓶10封板膜2张

样本处理及要求：

1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保

存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右

（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉

淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔

细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml

左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量1g，加入9ml的PBS、PH7.4，匀浆的比例1:9，匀浆液选取PBS

（PH7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）。离心20分钟左右（3000-5000转/分），仔细收集上清。

6.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

需自备的仪器耗材：

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

操作步骤：

1、加样：分别设标准孔、空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样

品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品

10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

3、温育：用封板膜封