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预防疾控微生物检验技术(医学高级)笔试考试历年练习题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.对疑似结核分枝杆菌感染的痰液标本进行抗酸染色时，若采用萋-尼氏染色法，其脱色剂应为：

A.3%盐酸乙醇

B.95%乙醇

C.丙酮

D.1%石碳酸复红

答案：A

解析：萋-尼氏染色法中，结核分枝杆菌因细胞壁含大量分枝菌酸，可抵抗盐酸乙醇的脱色，故用3%盐酸乙醇作为脱色剂。其他选项中，95%乙醇是革兰染色的脱色剂，丙酮常用于快速抗酸染色的脱色，石碳酸复红是初染剂。

2.检测军团菌最敏感的分子生物学方法是：

A.16SrRNA基因测序

B.mip基因PCR

C.实时荧光定量PCR

D.脉冲场凝胶电泳（PFGE）

答案：C

解析：实时荧光定量PCR（qPCR）可通过检测军团菌特异性基因（如5SrRNA、mip基因）的拷贝数，实现快速、定量检测，灵敏度高于普通PCR。16SrRNA基因测序用于种属鉴定，mip基因PCR是常规检测方法但灵敏度低于qPCR，PFGE用于菌株分型。

3.进行血培养时，若怀疑为布鲁菌感染，需延长培养时间至：

A.5天

B.7天

C.14天

D.21天

答案：C

解析：布鲁菌为胞内寄生菌，生长缓慢，常规血培养瓶需培养至14天，若仍无细菌生长方可报告阴性。延长培养时间可提高检出率，避免漏诊。

4.以下哪种病毒的实验室检测需在BSL-3实验室进行？

A.登革病毒

B.新型冠状病毒（Omicron变异株）

C.汉坦病毒

D.流感病毒

答案：C

解析：汉坦病毒属于第二类病原微生物，感染后可引起肾综合征出血热，需在BSL-3实验室进行病毒分离培养。登革病毒（BSL-2）、新型冠状病毒（当前调整为BSL-2+）、流感病毒（BSL-2）均在BSL-2实验室操作即可。

5.用于霍乱弧菌快速鉴定的经典生化试验是：

A.氧化酶试验

B.霍乱红试验

C.嗜盐性试验

D.黏丝试验

答案：D

解析：黏丝试验是霍乱弧菌的特征性试验，原理是霍乱弧菌能分解甘露醇产生酸，使培养基pH降低，菌悬液与0.5%去氧胆酸钠溶液混合后形成黏稠丝状物。氧化酶试验为阳性（非特异性），霍乱红试验因假阳性多已少用，嗜盐性试验用于区分霍乱弧菌与副溶血性弧菌（后者需3%NaCl）。

二、案例分析题（每题15分，共45分）

案例1：某社区暴发急性胃肠炎疫情，10例患者出现腹泻（水样便）、呕吐，无发热。粪便标本镜检未见白细胞，电镜观察到27nm无包膜小球形病毒颗粒。

问题：

（1）最可能的病原体是什么？需进一步做哪些实验室检测？

（2）该病毒的实验室检测质量控制要点有哪些？

答案：

（1）最可能的病原体是诺如病毒（Norovirus）。依据：急性胃肠炎、水样便、无白细胞（区别于细菌或寄生虫感染）、电镜显示27nm无包膜小球形病毒（符合诺如病毒形态）。需进一步检测：①实时荧光RT-PCR检测诺如病毒GI、GII型特异性基因（如RNA聚合酶区或衣壳蛋白区）；②抗原检测（免疫层析法或ELISA）；③若需分型，可通过序列测定分析VP1基因。

（2）质量控制要点：①样本采集与保存：发病后48-72小时内采集粪便或肛拭子，-80℃保存避免RNA降解；②核酸提取：使用经验证的病毒RNA提取试剂盒，设置阳性（病毒RNA标准品）、阴性（无RNA酶水）和内标（如MS2噬菌体RNA）对照，避免假阴性；③PCR扩增：引物探针需覆盖当前流行株（如GII.4型），避免因变异导致漏检；④结果判读：Ct值≤35为阳性，35-40需重复检测，＞40为阴性；⑤实验室生物安全：在BSL-2实验室操作，避免气溶胶污染。

案例2：某医院ICU分离出1株革兰阴性杆菌，对头孢他啶、亚胺培南耐药，对头孢哌酮/舒巴坦敏感。表型检测显示金属β-内酰胺酶（MBL）阳性。

问题：

（1）该菌最可能携带哪种耐药基因？需通过哪些方法确证？

（2）针对该菌的实验室报告要求是什么？

答案：

（1）最可能携带NDM、IMP或VIM型金属β-内酰胺酶基因（如blaNDM-1）。表型MBL阳性提示产金属酶，但需通过分子生物学方法确证：①PCR扩增blaNDM、blaIMP、blaVIM等基因；②测序验证基因亚型；③接合试验或转化试验确认耐药基因的可转移性。

（2）实验室报告要求：①明确报告“产金属β-内酰胺酶（MBL）革兰阴性杆菌”；②列出所有检测药物的敏感/耐药结果（需包含碳青霉烯类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、氨基糖苷类等）；③注明该菌可能存在广泛耐药性，建议结合临床感染情