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病理检验技术
常规组织病理技术
组织切片的封片
封片
概念:组织切片完成染色,经过脱水透明后,为了易于在显微镜下观察,并能长时间保存备查,就需用封固剂把染片封固起来称封片。
封固剂的特性:必须具有牢固的黏性,折光性好,折光率与玻片相差不大,能与透明剂相混合,中性,对染料无影响。
封片
封固剂的种类:常用的封固剂有以下两种
1.非水溶性胶
应用范围:主要用于染色后经无水乙醇脱水,二甲苯透明的染色玻片的封片,要求所用的染料和着染的物质成分不被二甲苯溶解或脱色,如HE染色、用DAB显色的免疫组织化学染色、绝大多数的特殊染色和组织化学染色等。
常用非水溶性胶:主要有国产的中性树胶和进口的树胶如加拿大树胶和DPX合成树胶等。
特性:透光性好、不易褪色、封片牢固,不易发霉等。
封片
2.水溶性胶
应用范围:主要用于染色后不能经无水乙醇脱水,二甲苯透明的染色片的封片。组织细胞中的一些成分如脂肪和一些染料、显色剂如3-氨基-9-乙基咔唑(AEC)等能被二甲苯溶解,所以切片染色后只能用水溶性胶封片。水溶性胶一般用水配制,组织切片经过染色水洗后即可用水溶性胶封片。常水溶性胶:有甘油明胶和阿拉伯糖胶以及进口的专用水溶性胶等。
封片
2.水溶性胶
特性:透光性较差,容易褪色,封片也不够牢固,受潮容易发霉。所以用水溶性胶封片后,在盖玻片四周再用中性树胶作一堤围状封固,可以加强封固作用,防止发霉,延长褪色时间。
封片
封片的注意事项:
HE染色及大多数染色常用中性树胶作为封固剂,中性树胶为无色或淡黄色黏稠液体,可用二甲苯稀释,其折光率与玻片的折光率接近。
封片
封片的注意事项:
切片封固时树胶的浓度要适中,如过浓,封片时易带有气泡,容易造成树胶太厚和盖玻片不平,影响在显微镜成像;如过稀,封片时树胶外溢,既不美观,又会使树胶稀释挥发后形成空泡而不能密封切片,导致切片容易褪色。
树胶不能加热,否则氧化后颜色加深变黄,使组织细胞染色失真,影响观察。加热又可导致树胶变酸,使切片容易褪色。
已封固的染色玻片,应避免在日光下照射,否则也可使染片褪色。
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