基于OCT散射量化表征细胞分布的研究.pdfVIP

基于OCT散射量化表征细胞分布的研究.pdf

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摘要

随着组织工程和再生医学的快速发展,无标记、非侵入性的可视化和量化三

维组织模型中的细胞分布在组织工程领域具有重要意义。使用先进的成像技术监

测细胞越来越重要,如细胞的分布、运动及生长情况。多种成像模式已被用于组

织工程的检测,如CT、MRI、超声等成像精度低,无法满足细胞成像的需求,

同时射线会对细胞造成不可逆的损伤。激光共聚焦成像技术只能成像微米级的深

度,对于毫米厚的支架无法实现深度成像。OCT具有高分辨率、合适的成像深

度、无损等特点,是组织工程中最理想的检测工具。

本文以单次散射和多次散射两种提取散射系数的理论模型,研究了传统的基

于OCT图像拟合斜率的提取算法,根据实验室搭建的OCT系统测量了已知光学

特性的聚苯乙烯微球组织模拟液的散射系数,通过对比Mie散射的计算结果表

明该算法的有效性。对于均匀和同种介质的散射系数提取具有较高的可靠性,但

在组织工程中细胞随机不均匀的分布以及细胞大小的不同,拟合斜率的方法已不

再适用。因此,提出一种基于单次散射模型的深度分辨散射系数计算方法,获取

散射系数分布图来量化表征细胞浓度以及分布特征。对该方法进行了数值模拟来

探究相关的特性,随着成像深度越深,散射系数的估计越大。

细胞的分布以及生长情况关系到组织的发育,对组织工程支架中细胞检测,

如细胞分布、增殖、分化等可以提供组织发育有力的帮助。使用OCT成像不同

浓度细胞悬浮液以及细胞负载水凝胶支架,并使用深度分辨散射系数计算方法获

取了散射系数分布图。相比于OCT图像,散射系数分布图可以深度分辨细胞的

分布情况,表征材料和细胞之间的散射特性差异,并且对比度更明显。由统计的

强度和散射系数分布直方图可知,强度分布直方图无法区别细胞的浓度以及支架

中的细胞,散射系数分布直方图则出现表征细胞浓度的特征峰,且该特征峰与背

景散射特征峰的偏离程度与细胞浓度成线性关系。最后通过HE染色验证水凝

胶支架中细胞的分布。

关键词:光学相干层析,散射系数,深度分辨散射,细胞分布

ABSTRACT

Withtherapiddevelopmentoftissueengineeringandregenerativemedicine,label-

free,non-invasivevisualizationandquantificationofcelldistributioninthree-

dimensionaltissuemodelshaveimportantsignificanceinthefieldoftissueengineering.

Itisincreasinglyimportanttomonitorcellsusingadvancedimagingtechniques,such

ascelldistribution,movementandgrowth.Avarietyofimagingmodeshavebeenused

fortissueengineeringdetection,suchasCT,MRI,ultrasoundandotherimaging

accuracyislow,unabletomeettheneedsofcellimaging,radiationwillcause

irreversibledamagetocells.Laserconfocalimagingtechnologycanonlyimagethe

depthofmicron,butcannotachievedepthimagingformillimeterthickscaffolds.OCT

isanidealtoolfortissueengineeringbecauseofitshighresolution,appropriateimaging

depthandnondestructiveproperties.

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