羊肚菌多糖的制备及其对DSS诱导小鼠结肠炎的改善作用.pdfVIP

羊肚菌多糖的制备及其对DSS诱导小鼠结肠炎的改善作用.pdf

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摘要

炎症性肠病(IBD)为特发性累及胃肠道的慢性炎症性疾病,目前IBD的发

病率呈逐年上升的趋势,已成为全球性的公共健康问题。研究发现天然活性多糖

具有缓解和改善IBD的功效,且具有低毒、安全、经济、高效等优点。羊肚菌是

一种珍稀的药食同源真菌,含多种人体必需氨基酸、多糖、蛋白质、脂类和微量

元素等多种活性成分,具有独特的风味和较强的保健作用。多糖是羊肚菌的主要

功能活性成分之一,具有降血脂、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节和器官保护等多种

生物活性,但羊肚菌多糖是否具有改善结肠炎的功效仍有待探究。

本论文以羊肚菌多糖为研究对象,采用水提醇沉法从羊肚菌子实体中提取羊

肚菌多糖(MEP),并结合凝胶渗透色谱(GPC)、气相色谱(HPLC)、傅里叶红

外光谱(FT-IR)、核磁共振(NMR)、扫描电镜(SEM)等技术对MEP进行结构

表征;通过建立体外模拟消化系统,探究羊肚菌多糖在胃肠道消化过程中的变化;

通过自由饮水3%葡聚糖硫酸钠(DSS)水溶液的方式诱导结肠炎小鼠模型,评

价MEP对结肠炎症状的的改善作用。主要研究结果如下:

(1)采用水提醇沉法从羊肚菌中获得多糖组分MEP。该多糖总糖含量为

89.81%,分子量为24.2kDa,单糖组成为甘露糖、鼠李糖和半乳糖醛酸。FT-IR以

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及H-NMR及C-NMR图谱揭示,MEP重复单元结构中涉及四种不同糖残基,

同时含有α与β构型的吡喃糖。扫描电镜结果显示MEP呈现片状结构,表面比

较光滑,边缘存在刺状结构,分布疏松。

(2)经过唾液、胃液、小肠液的消化后,MEP分子量从24.2kDa降低为

12.2kDa,还原糖含量显著增加。整个消化过程不影响MEP的单糖组成。通过

SEM观察到经过体外消化后MEP的表观形貌由原来光滑的片状结构变为粗糙

的细丝状。

(3)动物实验分为4组,分别为正常组(Control)、DSS模型组(Model)、

羊肚菌多糖低剂量组(L-MEP,200mg/kg)和羊肚菌多糖高剂量组(H-MEP,

400mg/kg),连续灌胃14天。实验结果表明MEP能显著改善结肠炎小鼠体重减

轻趋势、降低DAI评分和脾脏指数、减少结肠炎性浸润、增加杯状细胞和隐窝

数量、维持结肠结构完整性,其中高剂量(400mg/kg)的MEP可显著抑制结肠

组织中IL-6表达,降低结肠组织中MDA、MPO的含量,显著增加GSH的浓度,

降低氧化应激和炎症反应,显著上调结肠组织中Occludin、MUC2的表达水平,

维持肠道屏障完整性。

本论文对提取到的羊肚菌多糖MEP进行了结构表征。通过体外模拟消化系

统,证实肠胃消化会影响MEP的结构稳定性。在此基础上,本论文探究了羊肚

菌多糖MEP改善结肠炎的作用,动物实验结果表明,MEP处理可显著改善肠道

屏障功能、减少氧化应激和炎症反应。研究结果表明,羊肚菌多糖具备开发治疗

结肠炎新药或者功能性食品产品的潜力。

关键词:羊肚菌多糖;结构表征;体外消化;结肠炎;肠黏膜屏障

Abstract

Inflammatoryboweldisease(IBD)isachronicidiopathicinflammatorycondition

involvingthegastrointestinaltract.Currently,theprevalenceofIBDisrisingannually,

emergingasaworldwidepublichealthissue.Studieshavefoundthatnaturalactive

polysaccharideshavetheefficacyofalleviatingandimprovingIBD,andhavethe

advantagesoflowtoxicity,safety,economyandhighefficiency.Morche

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