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第五章
1.如何理解PCR原理及过程?
该技术基本原理类似于DNA的天然复制过程,是在引物、Dntp和模板DNA存在下,由
DNA合成酶催化的DNA合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,通过人工合成的寡
核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成双链。在一定的条件下,DNA
聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3’-OH末端,沿模板5’-3’方向延伸,形成一条新的
DNA互补链。
过程:(1)变性,将DNA加热至95℃左右,DNA双链发生解离,形成单链
(2)退火(复性),将温度降到55℃左右,引物与单链DNA
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