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细胞工程制药技术

一、植物胚胎培养概念

指胚(成熟胚或未成熟胚)或具胚器官在离体无菌条件下进行培养，以获得发育正常

的植株的技术。

种子的形态存有差异，但种子基本结构却是一致的。一般种子都由种皮（seedcoat，

testa）、胚（embryo）、胚乳（endosperm）三部分组成。

有些种子成熟后胚乳消失，形成无胚乳种子。

少数种类的种子还具有外胚乳（per-isperm）结构。

胚乳(Endosperm)：有或无。胚乳种子中储藏营养物质的薄壁组织。

依种子在成熟时是否具有胚乳，将种子分为两种类型：

有胚乳种子（albuminousseed）

无胚乳种子（exalbuminousseed）

二、植物胚胎培养的类型：

胚培养(embryoculture)

胚乳培养(endospermculture)

胚珠培养(ovuleculture)

子房培养(ovaryculture)

1、胚培养：

无菌条件下将胚

从胚珠（幼胚）或

种子中（成熟胚）

分离出来，置于培

养基上进行离体

培养获得再生植

株的方法。胚龄越小，所需的营养物质就愈复杂，也愈难培养。

A.成熟胚为子叶期以后的胚，其在简单的基本培养基上即可萌发生长。对培

养条件和操作技术要求相对简单。主要适用于珍稀杂种的种子萌发及某些难繁殖植物的

抢救等，可以克服由种皮或果皮等造成的发芽障碍，同时也可避免自然环境对种子萌发

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的不利影响。

B.幼胚培养:对未发育成熟的胚进行培养。要求较好的培养条件和较复杂的操

作技术（胚剥离）。

步骤：1）材料的选择与灭菌：适宜于幼胚培养的胚发育时期多为球形胚至

鱼雷形胚期。

2）幼胚剥离的注意事项：

a，借助于解剖镜；

b，注意保湿；

c，动作迅速；

d，带胚柄取出；

e，立即接种。

3）幼胚的接种培养

幼胚离体培养中常见的生长发育方式：

胚性发育(embryonaldevelopment)——幼胚接种到培养基上以后，仍然按

照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚，然后再按种子萌发途径出苗形成完整植

株，这种途径发育的幼胚一般一个幼胚将来就是一个植株。

早熟萌发(earlymaturesprouting)——幼胚接种后，离体胚不继续胚性

生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，通常称为早熟萌发。

愈伤组织——在许多情况下，幼胚在离体培养中首先发生细胞增殖，形成愈

伤组织。一般来讲由胚形成的愈伤组织大多为胚性愈伤组织，这种胚性愈伤组织很容易

分化形成植株。

在大多数情况下，一个幼胚萌发成一个植株，但有时会由于细胞分裂产生大量的胚

性细胞，以后形成许多胚状体，从而可以形成许多植株，这种现象就是所谓的丛生胚现

象。

影响幼胚培养的因素：

1）培养基

A.基本培养基——幼胚要求更复杂的培养基。除了一般的无机盐成分

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外，还要加入微量元素和生长辅助物质，不同发育时期的幼胚对培养基成份要求不同，

胚龄越小培养及成分越复杂。K+、Ca2+水平稍高有利于幼胚培养。

B.蔗糖：（糖的作用：调节渗透压；碳源；防止幼胚早萌。）

渗透压的保持

对于幼胚培养相当重要，幼

胚需要蔗糖浓度较高。最适

蔗糖浓度随着胚的发育时

期而降低。

C.植物激素的作用：

低浓度的GA能促进幼胚的早熟萌发。有时GA还具有胚柄的作用。