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选择性必修三《生物技术与工程》第1章发酵工程第3节发酵工程及其应用
青霉素青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。早期科学家只能从青霉菌中提取少量,价格贵如金。早期1瓶规格大概20万单位的青霉素最高卖到一根金条如今1瓶规格160万单位的青霉素注射剂一元?天价白菜价实现手段:发酵工程从社会中来
对发酵原理的认识微生物纯培养技术建立密闭式发酵罐设计成功严格控制环境条件(温度、pH、溶解氧、压强、营养物、泡沫等)大规模生产发酵产品微生物的特定功能现代化工程技术利用微生物的特定功能,通过现代化工程技术,生产对人类有用的物质的技术体系。1.发酵工程的概念:一、发酵工程的基本环节
选育菌种扩大培养接种灭菌配制培养基发酵罐内发酵分离、提纯产物获得产品发酵工程的基本环节和发酵罐示意图发酵工程的中心环节一、发酵工程的基本环节
1.选育菌种(1)发酵工程中菌种是关键,优良的菌种是提高发酵产物的质量和产量的首要条件。生产柠檬酸黑曲霉生产啤酒啤酒酵母生产味精谷氨酸棒状杆菌①从自然界中筛选出优良菌种。②通过诱变育种或基因工程育种获得。菌种来源思考:发酵工程选用的菌种时需要考虑哪些因素?(p23)①在低成本的培养基上能迅速生长繁殖;②菌种不易变异、退化等;③发酵条件易控制;④生产所需代谢物的产量高一、发酵工程的基本环节
2.扩大培养工业发酵罐的体积一般为几十立方米到几百立方米,接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。所以,在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。(1)目的:(2)扩大培养的培养基(物理性质):菌种进行扩大培养的最佳时期?将培养到增长速率最快时期的菌体分开,再进行培养。增加菌种数量,缩短生产周期。一般为液体培养基。一、发酵工程的基本环节
3.培养基的配制配置要求:在菌种确定之后,结合菌种代谢特点选择原料制备培养基;在生产实践中,培养基的配方要经过反复试验才能确定(即不断优化培养基)。4.灭菌(1)灭菌原因:发酵工程种所用的菌种大多是单一菌种,一旦有杂菌污染,可能导致产量大大降低。(2)灭菌目的:避免因杂菌污染而影响产品的品质和产量。在谷氨酸发酵过程中混入放线菌,则放线菌分泌的抗生素会使大量的谷氨酸棒状杆菌死亡。在青霉素生产过程中混入杂菌,某些杂菌会分泌青霉素酶,分解青霉素。培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌一、发酵工程的基本环节
电动机发酵液冷却夹层生物传感器pH计冷却水排出口培养物或营养物质的加入口观察孔温度传感器和控制装置阀门搅拌叶轮空气入口排气管取样管冷却水进入口抽取样本进行检测调节罐压控制冷水流速调节罐温控制溶解氧含量使微生物与发酵液混合均匀,加快O2的溶解以及散热使培养物流出发酵罐,实现连续培养5.接种:将扩大培养后的菌种投放到发酵罐中。放料管一、发酵工程的基本环节
6.发酵罐内发酵(中心环节)(1)发酵过程的监控①发酵过程中随时取样,检测培养液中的微生物数量、产物浓度等,了解发酵进程。②及时添加必需的营养组分。③严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件。(2)严格控制发酵条件的原因(3)优点:环境条件不仅影响微生物生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成。谷氨酸的发酵生产中:谷氨酸棒状杆菌在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸,在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。发酵过程中使用大型发酵罐均有计算机控制系统能对发酵过程中的温度、pH、溶氧量、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行检测和控制,还可以进行反馈控制,使发酵全过程处于最佳状态。一、发酵工程的基本环节
7.分离、提纯产物①发酵产品是微生物细胞本身②发酵产品是代谢物根据产物性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。过滤、沉淀发酵液菌体分离、干燥产品发酵液预处理细胞分离细胞破碎细胞破碎分离初步纯化高度纯化成品加工胞外产物8.获得产品一、发酵工程的基本环节
思考?讨论发酵工程基本环节分析微生物菌种资源丰富,选择发酵工程用的菌种时需要考虑哪些因素?思考1②产物方面生产所需代谢物的产量高④设备方面发酵条件容易控制③菌体方面菌种不易变异、退化①原料方面在低成本的培养基上能迅速生长繁殖
怎么对发酵条件进行调控以满足微生物的生长需要?思考2用计算机控制系统对温度、pH、溶解氧等发酵条件进行监测和控制,使其最适合微生物的生长繁殖,同时及时添加必要的营养组分。在产物分离和提纯方面,发酵工程与传统发酵技术相比有哪些改进之处?思考3传统发酵技术获得的产物一般不是单一的组分,而是成分复杂的混合物,很多时候不会再对产物进行分离和提纯处理,或者仅采用简单的沉淀、过滤等方法来分离和提纯产物。发酵工程中使用的分离和提纯产物的方法较多。在产物的初分离阶段,常采用沉淀、萃取、膜分离、吸附和离子交换等方法;在进一步纯化阶段,会采用液相层析
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