毛细管等速电泳.pptVIP

第1页，共23页，星期日，2025年，2月5日等速电泳所要求的条件:1.特殊的电解质系统:在毛细管等速电泳中,用有效淌度比样品中任何离子的有效淌度都大,并具有一定缓冲能力的离子作为前导电解质(leadingelectrolyte),加入到末端(检测端)电解槽和毛细管中,用有效淌度比样品中任何离子的有效淌度都小,并具有一定缓冲能力的离子作为尾随电解质(terminatingelectrolyte)加入起始端电解槽中.样品加在前导电解质和尾随电解质之间.系统中要加入对离子,以满足电中性的要求.第2页，共23页，星期日，2025年，2月5日区带电泳和等速电泳使用的电解质溶液的不同在区带电泳中，整个系统都用同一种电解质充满，这种电解质被称为背景电解质或支持电解质。它运载电流并有一定的缓冲能力。在等速电泳中，不加入这样的背景电解质。第3页，共23页，星期日，2025年，2月5日 2.背景电流要小到足以克服区带电泳效应 在毛细管等速电泳中,由于没有一个背景电解质支持电流(毛细管等速电泳要求溶剂的自身电导可以忽略不计),各区带互相连接.第4页，共23页，星期日，2025年，2月5日第5页，共23页，星期日，2025年，2月5日毛细管等速电泳一般用恒流操作模式.

分离开始后,在电压的作用下,各组分由于淌度的不同被分离. 系统通电后, 样品中迁移速度最大的离子运动最快,但慢于前导电解质. 迁移速度最小的离子运动最慢,但快于尾随电解质,具有不同淌度的离子得到分离。恒稳态时所有区带具有相同的移动速度.第6页，共23页，星期日，2025年，2月5日 假定有区带L，A，B，C，T，则各区带的移动速度为：?vL=vA=vB=vC=vT?或：?LEL=?AEA=?BEB=?CEC=?TET?式中，?，有效淌度，E，电场强度第7页，共23页，星期日，2025年，2月5日

?LEL=?AEA=?BEB=?CEC=?TET

?由于?L〉?A〉?B〉?C〉?T，所以有:EL《EA《EB《EC《ET各区带的电场强度不同。前导电解质区带的电场强度最小。第8页，共23页，星期日，2025年，2月5日

?

毛细管等速电泳的特点1.自锐化效应： 若某一区带的离子进入前一区带，由于电场强度变小而减速，由若进入到下区带，由于电场强度变大而加速，都退回到原区带,结果导致各区带形成鲜明的界面.第9页，共23页，星期日，2025年，2月5日2.浓度特征第10页，共23页，星期日，2025年，2月5日 对于含有阴离子A1的区带和含有阴离子B2的区带，假定区带的配对离子分别为Q1和Q2.根据电中和原理，区带中的阳离子数和阴离子数必须相等，因此，CA,1=CQ,1和CB,2=CQ,2，第11页，共23页，星期日，2025年，2月5日在等速电泳中，I=相同值（电流值在各处相同），

而两区带速度相等：v1=v2

或，mAE1=mBE2

可变为：E1/E2=mB/mA

根据欧姆定律，I=E1l1=E2l2

(l为电导)，

第12页，共23页，星期日，2025年，2月5日

电导取决与溶质有效淌度和浓度:

?=(Ci?i+Cp?p)F

?

式中,?-电导;F–法拉第常数; Ci和Cp分别为样品和对离子浓度; ?i和?p分别为样品和对离子淌度.第13页，共23页，星期日，2025年，2月5日每个区带的电导可写为：

l1=CA,1mAF+CQ,1mQF=CA,1F(mA+mQ)，

l2=CB,2mBF+CQ,2mQF=CB,2F(mB+mQ),CA,1与CQ,1相等，CB2,与CQ,2相等第14页，共23页，星期日，2025年，2月5日在等速电泳中，I=常数(不同区带电流相同），

I=El，所以

E1l1=E2l2,E1CA,1F(mA+mQ)=E2CB,2F(mB+mQ)第15页，共23页，星期日，2025年，2月5日将上式变化，得到：第16页，共23页，星期日，20