第二节 色谱理论基础.pptVIP

第二节色谱理论基础*第1页，共31页，星期日，2025年，2月5日一、气相色谱流出曲线1.基线无试样通过检测器时，检测到的信号即为基线2.保留值（1）时间表示的保留值死时间（tM）：不与固定相作用的惰性物质的保留时间。保留时间（tR）：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间。调整保留时间（tR＇)：tR＇=tR－tM*第2页，共31页，星期日，2025年，2月5日(2)用体积表示的保留值死体积（VM）：VM=tM×F0保留体积（VR）：VR=tR×F0(F0为色谱柱出口处的载气流量，单位：mL/min)调整保留体积（VR＇）：VR＇=VR－VM*第3页，共31页，星期日，2025年，2月5日3.相对保留值r21组分2与组分1调整保留值之比：r21=t’R2/t’R1=V’R2/V’R1相对保留值只与柱温和固定相性质有关，与其他色谱操作条件无关，它表示了固定相对这两种组分的选择性。*第4页，共31页，星期日，2025年，2月5日4.区域宽度用来衡量色谱峰宽度的参数，有三种表示方法：（1）标准偏差(?)：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。（2）半峰宽(Y1/2)：色谱峰高一半处的宽度Y1/2=2.354?（3）峰底宽(Wb)：Wb=4?*第5页，共31页，星期日，2025年，2月5日二、容量因子与分配系数分配系数K：组分在两相间的浓度比；容量因子k：平衡时，组分在各相中的质量比；k=MS/MmMS为组分在固定相中的质量，Mm为组分在流动相中的质量。容量因子k与分配系数K的关系为：式中β为相比。填充柱相比：6～35；毛细管柱的相比：50～1500容量因子越大，保留时间越长。可由保留时间计算出容量因子，两者有以下关系：*第6页，共31页，星期日，2025年，2月5日塔板理论基本假设：将色谱柱视为精馏塔1）塔板之间不连续；2）塔板之间无分子扩散；3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H；4）某组分在所有塔板上的分配系数相同；5）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入。三、塔板理论-柱分离效能指标*第7页，共31页，星期日，2025年，2月5日*第8页，共31页，星期日，2025年，2月5日*第9页，共31页，星期日，2025年，2月5日色谱柱长：L，虚拟的塔板间距离：H，色谱柱的理论塔板数：n，则三者的关系为：n=L/H理论塔板数与色谱参数之间的关系为：*第10页，共31页，星期日，2025年，2月5日有效塔板数和有效塔板高度单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。组分在tM时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度：*第11页，共31页，星期日，2025年，2月5日塔板理论的特点和不足：(1)当色谱柱长度一定时，塔板数n越大(塔板高度H越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。(2)不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。(3)柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。(4)(不足)该理论是在理想情况下导出的，未考虑分子扩散因素、其它动力学因素对柱内传质的影响。因此它不能解释：a.峰形为什么会扩张？b.影响柱效的动力学因素是什么？*第12页，共31页，星期日，2025年，2月5日四、速率理论-影响柱效的因素速率方程（也称范·弟姆特方程式）:H=A+B/u+C·uH：理论塔板高度，u：载气的线速度(cm/s)减小A、B、C三项可提高柱效；存在着最佳流速；A、B、C三项各与哪些因素有关？*第13页，共31页，星期日，2025年，2月5日1.涡流扩散项－AA=2λdpdp：固定相的平均颗粒直径λ：固定相的填充不均匀因子固定相颗粒越小dp↓，填充得越均匀，A↓，H↓，柱效n↑。表现在涡流扩散所引起