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2025年(生物药物制备技术(蛋白药物方向))蛋白药物制备试题及答案

一、单项选择题（每题1分，共20分）

1.在CHO细胞表达系统中，最常用的启动子是

A.CMV

B.SV40

C.EF1α

D.UBC

答案：A

解析：CMV启动子具有强转录活性，适合驱动外源蛋白在CHO细胞中的高表达。

2.下列哪种层析技术最适合用于去除宿主细胞蛋白（HCP）？

A.离子交换层析

B.疏水层析

C.亲和层析

D.凝胶过滤层析

答案：A

解析：离子交换层析可根据电荷差异有效分离HCP与目标蛋白。

3.在蛋白药物上游工艺中，提高比生产率（qP）最直接的手段是

A.降低培养温度

B.增加接种密度

C.优化密码子

D.延长培养时间

答案：C

解析：密码子优化可提升翻译效率，直接提高单位细胞的蛋白产量。

4.用于检测蛋白药物二硫键错配的最佳工具是

A.SDS

B.IEF

C.RP-HPLC

D.Peptidemapping

答案：D

解析：肽图分析结合还原/非还原条件可精确定位二硫键连接方式。

5.在下游纯化中，病毒灭活步骤通常安排在

A.捕获层析后

B.低pH孵育后

C.阴离子交换后

D.超滤浓缩后

答案：B

解析：低pH孵育（pH3.6，60min）是经典病毒灭活步骤，常放在捕获层析后。

6.下列哪种添加剂可有效抑制蛋白聚集？

A.氯化钠

B.精氨酸

C.甘油

D.EDTA

答案：B

解析：精氨酸通过屏蔽疏水表面和抑制蛋白-蛋白相互作用减少聚集。

7.在单克隆抗体纯化中，ProteinA亲和层析的洗脱pH通常为

A.7.4

B.5.5

C.3.5

D.8.0

答案：C

解析：pH3.5可破坏ProteinA与Fc的相互作用，实现温和洗脱。

8.用于评估CHO细胞基因组稳定性的标记基因是

A.DHFR

B.GS

C.Neo

D.GFP

答案：B

解析：谷氨酰胺合成酶（GS）系统通过MSX加压维持外源基因长期稳定。

9.在生物反应器放大过程中，保持恒定哪个参数最有利于维持产物质量？

A.功率输入（P/V）

B.叶尖速度

C.氧传质系数kLa

D.混合时间

答案：C

解析：kLa决定溶氧水平，直接影响糖基化模式与产物质量。

10.下列哪种修饰最可能引起蛋白药物免疫原性显著升高？

A.C端赖氨酸缺失

B.氧化甲硫氨酸

C.非人源糖基化（Galα1-3Gal）

D.N端焦谷氨酸化

答案：C

解析：Galα1-3Gal表位在人体存在天然抗体，可引发急性免疫反应。

11.在UF/DF过程中，导致通量下降的最主要机制是

A.浓差极化

B.膜孔堵塞

C.蛋白变性

D.剪切损伤

答案：A

解析：浓差极化形成凝胶层，是通量衰减的主因。

12.用于实时监测糖基化异构体的在线技术是

A.Raman光谱

B.NIR

C.2D-Fluorescence

D.SPR

答案：A

解析：Raman可解析糖环振动模式，实现糖型快速区分。

13.在细胞培养基中，锰离子浓度升高会促进

A.高甘露糖糖型

B.杂合型糖型

C.双天线糖型

D.唾液酸化

答案：A

解析：Mn2?是α-1,2-甘露糖苷酶辅因子，抑制其活性导致高甘露糖积累。

14.下列哪种病毒清除验证模型病毒属于包膜RNA病毒？

A.MVM

B.Reo-3

C.X-MuLV

D.SV40

答案：C

解析：X-MuLV为逆转录病毒，包膜RNA，尺寸约80–120nm。

15.在制剂开发中，若抗体出现“乳光”现象，最可能原因是

A.游离巯基氧化

B.部分折叠中间体

C.液-液相分离（LLPS）

D.糖基化缺失

答案：C

解析：高浓度抗体在特定pH/离子强度下形成致密液滴，导致乳光。

16.用于预测蛋白聚集倾向的计算机算法是

A.Rosetta

B.AggScore

C.PyMOL

D.GROMACS

答案：B

解析：AggScore基于序列疏水性与β-折叠倾向打分。

17.在连续灌流培养中，细胞截留设备首选

A.深层滤器

B.切向流过滤（TFF）

C.交替切向流（ATF）

D.离心机

答案：C

解析：ATF通过隔膜泵交替反向冲洗，维持高通量低剪切。

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