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2025年(生物工程)生物工程技术试题及答案

一、单项选择题（每题1分，共20分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）

1.在CRISPR-Cas9系统中，负责识别靶DNA序列的组分是（）

A.Cas9蛋白B.tracrRNAC.crRNAD.PAM序列

答案：C

解析：crRNA通过碱基配对识别靶DNA，tracrRNA与crRNA结合形成sgRNA，Cas9负责剪切，PAM是识别前提而非识别组分。

2.下列哪一项不是哺乳动物细胞表达系统常用的强启动子（）

A.CMVB.EF1αC.T7D.CAG

答案：C

解析：T7启动子为原核系统专用，需T7RNA聚合酶，哺乳动物细胞无此酶。

3.在双相发酵生产PHA时，限制碳源突然充足会导致（）

A.菌体密度下降B.PHA合成速率下降C.副产物乙酸积累D.溶氧升高

答案：C

解析：碳源过量引起Overflowmetabolism，乙酸大量分泌，抑制细胞生长及PHA合成。

4.关于腺相关病毒（AAV）载体，下列说法正确的是（）

A.可包装超过8.5kb的外源片段

B.基因组为线性双链DNA

C.整合位点具有高度随机性

D.野生型AAV依赖辅助病毒完成复制

答案：D

解析：AAV为单链DNA病毒，包装上限约4.7kb，整合偏好AAVS1位点，复制需腺病毒或疱疹病毒辅助。

5.在酶定向进化中，DNAshuffling与易错PCR相比，其优势主要在于（）

A.引入点突变频率更高

B.可重组有益突变

C.操作更简便

D.无需测序验证

答案：B

解析：DNAshuffling通过同源重组将多个有益突变整合，实现“突变重组协同”。

6.采用CHO细胞生产单抗时，最常用于基因扩增的筛选标记是（）

A.NeoB.DHFRC.GSD.BSD

答案：B

解析：DHFR/MTX系统可通过逐步提高MTX浓度实现目的基因共扩增，提高表达量。

7.下列哪项技术可直接在单细胞水平检测mRNA与蛋白质共表达（）

A.scRNA-seqB.CITE-seqC.ATAC-seqD.scATAC-seq

答案：B

解析：CITE-seq利用DNA条形码抗体与转录组同时测序，实现单细胞mRNA-蛋白双组学。

8.关于微生物合成异源植物萜类化合物，下列策略对提高产量最无效的是（）

A.引入MVA途径B.过表达DXSC.敲除竞争途径基因D.降低培养pH至4.0

答案：D

解析：过低pH抑制细胞生长及酶活，反而降低产量，其余均为常用正向策略。

9.在3D生物打印中，用于瞬时提高Bioink粘度的最常用牺牲材料是（）

A.明胶B.琼脂糖C.PluronicF127D.海藻酸钠

答案：C

解析：PluronicF127在低温溶胶、室温凝胶，打印后低温洗去，实现悬空结构支撑。

10.下列哪项不是合成生物学“设计-构建-测试-学习”循环中的关键使能技术（）

A.自动化DNA组装B.微流控筛选C.机器学习建模D.聚丙烯酰胺凝胶电泳

答案：D

解析：PAGE仅为常规分析手段，不属于DBTL循环核心使能技术。

11.在植物CRISPR碱基编辑中，目前可实现A·T→G·C的编辑器是（）

A.BE3B.ABE8eC.CBE4D.PE2

答案：B

解析：ABE（AdenineBaseEditor）催化A→I（读为G），实现A·T→G·C。

12.关于肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法，下列步骤排序正确的是（）

1.快速扩增2.肿瘤组织切除3.体外IL-2刺激4.回输患者

A.2-3-1-4B.2-1-3-4C.3-2-1-4D.2-3-4-1

答案：A

解析：先取瘤体，IL-2初步刺激后快速扩增，质检合格后回输。

13.在利用大肠杆菌合成人生长激素（hGH）时，采用融合表达策略主要解决（）

A.二硫键错配B.蛋白降解C.包涵体复性D.信号肽加工

答案：B

解析：融合伴侣（如MBP）可保护hGH免受胞内蛋白酶降解，提高稳定性。

14.下列哪项不是影响mRNA疫苗体外转录产量的关键因素（）

A.帽类似物浓度B.模板DNA纯度C.Mg2?浓度D.反应温度

答案：A

解析：帽类似物影响翻译效