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《禽病防治技术》
病毒培养技术（新城疫病毒为例）
1目的
1.1以新城疫病毒为例，使检测员熟悉并掌握病毒鸡胚培养的方法，
能够收获培养的病毒。
2适用范围
2.1本实验适用于病毒鸡胚培养的过程。
3试剂和仪器设备
3.1试剂和材料：新城疫病毒LaSota株、孵化箱、9日龄鸡胚、照蛋
器、打孔针、1mL注射器、1mL量程移液器及配套吸头、酒精灯、酒
精棉球、铅笔、石蜡。
3.2仪器设备：孵化箱、超净工作台等。
4方法与步骤
4.1选用9日龄发育良好的鸡胚，照蛋标出气室及胚胎位置，在气室
底边胚胎附近处标出尿囊腔注射部位。
4.2鸡胚气室向上放置，用酒精棉球消毒气室及标记处蛋壳表面。
4.3在所标记注射部位用打孔针打孔，注意用力要稳，恰好使蛋壳打
通而不伤及壳膜。
4.4用1mL注射器抽取新城疫病毒LaSota株接种物，针头斜面（与
~
卵壳成30°角）刺入注射部位0.5cm1cm达尿囊腔内，注入
~
0.1mL0.2mL。
4.5注射完毕，用熔好的石蜡封闭注射孔。气室朝上于37℃温箱中孵
育。弃去24h内的死亡鸡胚，因多系机械损伤、细菌或霉菌污染等非
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《禽病防治技术》
~
特异性因素所引起。以后每天照胚1次2次。
4.6接种病毒24h后的死鸡胚以及孵育72h仍存活的鸡胚，取出置4℃
冰箱过夜或-20℃冰箱中1h，以免收获时流血。
4.7取出冷却的鸡胚，气室端卵壳表面用酒精棉球消毒，用镊子无菌
击破气室部卵壳并去除壳膜，撕破绒毛尿囊膜，以眼科镊子镊住绒毛
尿囊膜，用移液器吸取尿囊液和羊水，置于无菌容器中冷冻保存备用。
一般能收获尿囊液6mL左右，最多可达10mL。
5结果分析与判断
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对收获的尿囊液进行血凝试验，如果血凝效价≥4log即为新城
疫病毒增殖成功。
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