稻瘟病菌黑色素合成和调控相关基因的功能研究.pdfVIP

浙江大学硕士学位论文

不是很好笑，但确实有时候让枯燥的实验多了一份乐趣。感谢师兄黄志成，有一

段时间我还挺疑虑到底该称呼师兄还是师弟的，最后我认为凭科研上的见地应该

称呼师兄，感谢你在我论文与实验中给予的大力帮助。感谢师妹王清和师弟李岩，

王清总是要提醒我健康打卡，让我实感惭愧，希望我毕业之后你能更省心，祝愿

你在科研道路一切顺利；李岩作为唯一的师弟简直是换水之光，你是个梗很多的

师弟，你跟小黄师姐的搭配真让日常的实验生活充满乐趣。感谢师姐虞沁，虽然

刚来实验室的时候跟你不是很熟，但因为共同的兴趣爱好让我们最终还是走到了

一起，这话听起来有点奇怪，但真心感谢你的出现，让我在那一段时间里跟你分

享很多喜怒哀乐。感谢师姐韦云云，有你的实验室总是充满欢声笑语，和你分享

八卦的时间很快乐，希望未来的日子里你能永远保持开心的样子，不要郁郁寡欢

不要头痛。感谢同级小伙伴蔡莹莹，你老是找我进行一些无聊的比赛，跟我进行

一些无聊的小学生对话，给我带来很多开心瞬间，但你真的挺像一个小孩的，希

望你能永远赤诚永远可爱，不要被实验带来的坏情绪裹挟。感谢我曾经的室友杨

舒画，很庆幸在浙大的三年能收获你这个好朋友，分享生活，希望你在未来的科

研中一切顺利，也希望你的生活充满喜悦。感谢师兄朱学明、闫煜鑫、李瑜、李

栋，感谢师姐李琳、代梦迪、吴旻、陈楠，感谢小伙伴王静怡、孙丽晓、刘梦宇、

张云然、吴希禹、曾宇兰、宋淋浩、刘常利，感谢师妹钱慧、朱加楠、沈自芳、

梁黎娟、吴铭华、邹玉、王孜禾、卢宣君，祝愿你们的科研生活一切顺利，硕果

累累。

最后，感谢所有爱我之人的陪伴。在此，我要郑重感谢我的父母，感谢你们

的辛勤付出，将我养育成人，感谢你们一路支持我的所有选择，作为我坚强的后

盾。今后我一定在新的人生征程上继续努力，勇敢前行，也让我来做你们的人生

港湾，一路庇护。

II

浙江大学硕士学位论文

摘要

稻瘟病菌（Magnaportheoryzae）是一种丝状植物致病真菌，能够在水稻生长

发育各个阶段的各个部位发生侵染，从而造成水稻病害。稻瘟病菌具有典型的侵

染循环，在自然界风和雨水的作用下，分生孢子落在植物表皮上，萌发出芽管，

芽管尖端膨大分化形成附着胞。随着附着胞的成熟，它的细胞壁内侧将有黑色素

沉积，从而使细胞内积累甘油等溶质、产生膨压，使得附着胞形成侵染钉以穿透

植物表皮。侵染钉进入植物细胞后将分化形成侵染菌丝进行侵入后生长，并产生

次生侵染菌丝穿透周围的其他细胞。稻瘟病菌在植物组织内快速繁殖，使之产生

病斑。在高温高湿的条件下，病斑处产生的分生孢子又能传播到其他植株上发生

侵染，从而造成病害。

稻瘟病菌黑色素的生物合成主要由黑色素合成基因（ALB1、RSY1和BUF1等）

控制。目前针对稻瘟病菌黑色素合成基因的功能已经有了许多研究，这些研究大

多基于通过自发突变或诱导突变产生的黑色素合成相关基因缺陷突变体。然而，

在这些突变体中，相关蛋白依然存在。黑色素合成基因的功能有必要在不同的菌

株中得到进一步验证。在本研究中，我们在两个野生型菌株（Guy11和70-15）中

通过敲除或过表达三个黑色素合成基因（ALB1、RSY1和BUF1）来确认黑色素在

稻瘟病菌的生长发育和致病过程中不可或缺的作用。两个野生型菌株中，ALB1、

RSY1或BUF1的缺失均会导致黑色素合成缺陷和致病性的丧失。Guy11中的ALB1、

RSY1和BUF1与70-15中BUF1都是产孢所必需的基因。在两个野生型菌株中，

ALB1、RSY1和BUF1都对保护分生孢子对抗环境压力（紫外线、氧化剂和冷冻伤

害）有着重要作用。比较两个野生型，Guy11细胞中的黑色素含量较70-15更高，

其黑色素合成基因在mRNA水平上的表达量也更高。黑色素合成基因敲除突变体

与过表达突变体的成对培养实验表明，ALB1、RSY1和BUF1三个基因中，Buf1

催化的黑色素合成反应是70-15中黑色素生物合成的主要限速步骤之一。

除了黑色素合成基因之外，转录因子对稻瘟病菌黑色素生物合成的调控也十

分重要。