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2、稀释法:该法源于中野治房(1933)的方法。用已消毒试管5只,在第一管盛蒸馏水10mL,第2~5管都装5mL,用高压蒸汽消毒,待冷却后,第1管用滴管滴入混合藻液1~2滴,充分振荡,使均匀稀释。次用消毒吸管,从第1管中吸取5mL滴入第二管中如前振荡,使均匀稀释。以后依次同样滴入第3~5管,并都充分均匀稀释。然后把五个已盛又消毒的琼胶培养基培养皿,加热使之溶解,待冷却而尚未凝固时,分别滴入五个试管的藻液各一滴,用力振荡,使藻液充分混于培养基中。待冷凝后,把五个培养皿放在受着漫射光窗口,一直到出现藻群时为止。在20℃左右时,约10天即出现藻群。用消过毒的白金丝取些藻群,进行琼胶固体培养基的不通气培养。此过程反复多次,直至得到完全分离的纯藻种群为止。此法稀释要使用较多容器分组培养,比较麻烦,但较易成功。第29页,共50页,星期日,2025年,2月5日3、微吸管法:将水样在载玻片上滴成绿豆粒大小的一些水滴,这样可使每个水滴中有很少生物而便于分离;在解剖镜下用微吸管(口径小至0.008~0.16mm,圆口,可自行拉制)。将要分离的藻体吸出,用蒸馏水或平衡矿物质溶液冲洗数次,然后主导成有培养基的小培养皿中培养,待生长旺盛后,再扩大培养。此法较适用于能运动的藻类。第30页,共50页,星期日,2025年,2月5日4、趋向反应法:利用藻类的特殊趋向性(如向光、向地等)不同而分离藻体。此过程反复几次就可得到一定纯度的藻体。分离效果较好,只是不能应用于不运动的藻体。第31页,共50页,星期日,2025年,2月5日5、平板分离法:在培养液中加入占培养液1.5%的琼胶,加溶解后,注入培养皿中,加盖后用15磅压力121℃灭菌20分钟,即制成胶质培养基(也可用硅酸胶和明胶制备)。在琼胶培养基放在40℃以下的水浴锅内,开盖用吸管注入混合藻液,摇匀,使之分散在培养基平面上。之后,可放在恒温箱内,用荧光灯照射,使藻群生长。再经镜检,反复此法不断提纯,即可分离出较纯的藻种。第32页,共50页,星期日,2025年,2月5日6、固氮蓝藻分离培养法:将一小片藻丝群接种到培养基上,几天后再用灭菌白金丝挑取生出的新藻丝接种到平板培养基上。这样经几次分离接种就得到较纯的藻种。第33页,共50页,星期日,2025年,2月5日六、藻种的选择、接种和保存1.藻种的选择:虽然藻类种类较多,但其中仅少数经过人工培养。应该研究在室外培养其他藻种的可能性和他们生产的潜力,所选择的生物种应具有下列特征:⑴生长迅速;⑵对极端的温度和辐射条件的耐性范围大;⑶蛋白质,脂类和糖类含量高,或有选择地积累一种特殊的代谢产物(如甘油);⑷无毒性,且易于收获。根据系统的要求和特殊的方法,还可有其他要求。第34页,共50页,星期日,2025年,2月5日2.接种:在分离到单纯藻群后,就可接种到培养液中进行培养,进而移养扩大培养。接种方法有液体接种和干藻接种。前者是将藻液直接加入培养液中进行搅拌,加入的藻种分量视水温而定,水温较低(10℃以内)时,多加;约占培养液总量的30~40%左右,水温适宜时(25~30℃左右),可加5~8%左右。后者若用干藻的藻体接种,接种量为0.1~0.2%。第35页,共50页,星期日,2025年,2月5日第1页,共50页,星期日,2025年,2月5日一、单细胞藻类的特性单细胞藻类(Unicelluleralgae),简称单胞藻。因藻体微小,又称微藻(Microalgae)。单胞藻具有利用太阳光能效率高、营养丰富、生长繁殖迅速、对环境的适应性强和容易培养等重要特性,因而受到重视。第2页,共50页,星期日,2025年,2月5日通过研究人们发现单胞藻在下列6个方面,可以开发利用:1、作为植物生理研究的试验材料。2、单胞藻的营养丰富,蛋白质含量高,氨基酸的种类组成及配比合理。脂肪含量高,富含动物需要的不饱和脂肪酸。还含有各种维生素和药用成分。可利用为人类的营养食品和健康食品。3、可作为水产动物的饵料和禽、畜饲料添加剂。第3页,共50页,星期日,2025年,2月5日4、可利用单胞藻提取色素、药物及甘油等化学产品。5、丛粒藻(BotryococcusbrauniiKutzing)含油量一般为干藻重的30%-50%,最高可达80%,是作为能源开发的对象。6、可利用单胞藻光合作用放出的大量氧气和吸收水中的富营养化成分来净化污水和保持良好的水环境条件。第4页,共50页,星期日,2025年,2月5日目前,有关海水藻类的培养较多,我国在海水养殖方面,已大规模展开了某些浮游植物的培
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