标准的PCR实验室设计规划基本要点及布局.docVIP

标准的PCR实验室设计规划基本要点及布局.doc

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BROLAB为实验室工作人员提供一个安全、环保、美观、舒适、智能的实验室

要仔细阅读和分析图样建立的空间概念外还应当前往工地现场实地勘察,进行全面、系统地调查分析,为实验室设计提供细致、可靠的依据。

标准的PCR实验室分为四个区域,分别为:

n1.试剂配制区;

n2.样品处理区;

n3.核酸扩增区;

n4.产物分析区;

如使用全自动分析仪,区域可适当合并。

PCR实验室设计规划平面布局

【各区的功能分别为】

试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。

样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。

扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。

扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。

使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。

在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:

在生物安全柜内操作;

每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材;

盛放污染材料的器皿密封并一次性使用;

用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。

PCR实验室建设规划要点

1、主体结构:

主体为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。

2、标准的三区分隔和气压调节:

所谓组合形式PCR实验室,是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。

试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。

核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到指定定点,且高度为地面铺装好后2600mm处。

如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。

各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。

实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。

PCR实验室主要设备

试剂准备区

仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等,加样器、天平除了要专用外,还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行扩增反应混合液应使用分子生物学级的,试剂制备好后应有质检:一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。

标本制备区

仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等

扩增区

扩增区的主要仪器是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。扩增仪需进行校准。并配备UPS电源,以防止由于电压的波动,停电对扩增效果的影响。

分析区

本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等洁净实验区的缓冲间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规定的。

一些琐碎的、不可忽略的设计

1.实验室空调通风系统设计及压力控制

PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

2.污染的预防与控制

PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;天然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验就必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,首先应是预防,而不是排除。

PCR实验室不可缺少的严格管理

(1)严格控制进出实验室的人员。与实验无关的人员不得随意进出实验室,有条件的情况下要设置独立的通道和进出整个实验区的门;

(2)尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性。

(3)扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源,废液不能在实验室中倾倒,必须经消毒液浸泡消毒后在远离实验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理,如焚烧等;

(4)扩增产物分

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