MYB29与GRF3互作调控芥菜细胞质雄性不育系硫苷合成机制.pdfVIP

非常感谢我的父母和姐姐这二十多年来对我生活、学习各方面的关心与支持，

感谢你们在我犯错时给我包容，在我失败时给我鼓励，在我迷茫时给我建议，在

我取得成绩时为我高兴。衷心祝愿你们健康快乐，万事顺意！

带着不舍，满怀希望，即将离开“浙”里，愿诸君前程似锦、幸福快乐，愿

浙江大学勇立潮头，跻身世界一流高校前列。

最后感谢各位评审老师在百忙之中评阅我的论文，感谢你们为本论文的完善

提供的宝贵建议。在此致以诚挚的谢意！

蔡庆泽

2021年5月于浙江大学紫金港校区

摘要

芥菜（Brassicajuncea）是重要的十字花科经济作物，作为蔬菜、油料和调

味品作物被广泛种植，芥菜独特的风味主要源于次生代谢物质硫苷

（Glucosinolates，GSLs）。细胞质雄性不育是其杂种优势利用的重要途径，不育

系中线粒体功能紊乱通常会通过线粒体反向信号途径（MitochondrialRetrograde

Signaling，MRS）调控核基因表达。线粒体反向信号在感知和响应内部和外部刺

激中起着至关重要的作用，优化生长以适应环境。然而，细胞质雄性不育系中的

线粒体反向信号关键基因及调控机制研究进展缓慢。实验室前期鉴定了芥菜细胞

质雄性不育系（CMS）的育性回复突变系（Revertant,REV），REV是由CMS突

变而来，利于比较研究。本研究探讨了GRF3（Generalregulatedfactor3）和MYB29

在调控线粒体反向信号和硫苷合成中的作用及机制。主要研究结果如下：

1.GRF3参与芥菜细胞质雄性不育系中线粒体反向调控信号和硫苷合成。我

们通过对芥菜CMS和REV的转录组比较分析，发现CMS系中GRF3在花蕾中

表达上调。推测GRF3可能参与CMS中线粒体反向信号调控和硫苷的合成。通

过同源比对和同源性建模，发现芥菜GRF3蛋白与酵母反向调控信号途径上重要

调控蛋白Bmh1/2p具有较高的同源性，亚细胞定位发现GRF3定位于细胞核和

质膜上。GRF3表达沉默后，芥菜保持系（MF）、CMS、REV系中硫苷含量均显

著降低。

2.MYB29基因调控细胞质雄性不育系中硫苷合成。通过比较芥菜MF、CMS、

REV19系中MYB29表达量和硫苷含量，发现在CMS系中MYB29的表达量和

硫苷含量显著高于MF和REV系。此外，在萝卜CMS和甘蓝CMS系中，MYB29

表达量和硫苷含量表现出同样趋势。同时，发现芥菜CMS系中硫苷生物合成相

关基因的表达显著高于MF和REV系。通过酵母单杂交筛选到MYB29可与

MAM1和SOT16两个硫苷合成基因启动子结合。因此，MYB29通过调控MAM1

和SOT16影响硫苷的合成。

3.MYB29与GRF3互作参与线粒体反向调控信号调控硫苷合成。GRF3与

MYB29是植物线粒体反向调控信号途径的重要因子，我们通过酵母双杂和双荧

光分子互补实验发现GRF3可与MYB29互作，GRF3与MYB29为线粒体反向

信号重要调控因子，因此，推测GRF3可能通过与MYB29互作通过反向调控信

号途径调控CMS系中硫苷积累，为基于CMS杂种优势利用提供科学依据。

关键词：芥菜；细胞质雄性不育；线粒体反向信号；GRF3；MYB29；硫苷

Abstract

BrassicajunceaisanimportantBrassicaceaeeconomiccrop.Itiswidely

cultivatedasvegetable,oilandcondimentcrops.TheuniqueflavorofBrassicajuncea

ismainlyderivedfromglucosinolates(GSLs)whicharethesecondarymetabolites.

Cytoplasm