大题06生物技术实践一-备战2022年高考生物之考前抓大题解析版.docxVIP

大题06生物技术实践（一）

1．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很强的实用性。研究者欲从热菜中筛选产生高温淀粉酶的嗜热菌，筛选流程如下图。实验中所用的1号培养基组分为水、无机盐、NH4NO2和X，Ⅱ号培养基组分为水、无机盐、NH4NO3、X和Y。

回答下列问题：

（1）产生高温淀粉酶的嗜热菌能从热泉中被筛选出来的原因是___________。

（2）培养基中的Y物质是___________，I、Ⅱ号培养基均属于__________培养基。

（3）I号培养基接种后需放在摇床重振荡培养，其目的是__________，在Ⅱ号培养基上接种完成后将培养基放在恒温培养箱中，调整温度为____________（填“30℃”“50℃”或“80℃”）。若培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色等不同，说明样品中含有多种产生高温淀粉酶的嗜热菌，判断依据是_______________。

（4）若要测定嗜热样品中能产生高温淀粉酶的菌体数量，请写出主要实验步骤：____________________。

【答案】（1）由于嗜热菌耐高温，能在热泉中存活

（2）琼脂（凝固剂）选择培养基

（3）供应微生物所需氧气，同时使营养物质与菌体充分接触，扩大培养80℃同一种微生物在培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色应相同

（4）取嗜热样品并加入一定量的无菌水稀释，涂布到选择培养基上（至少3个），培养一段时间后，选择菌落数为30～300的平板统计，再根据公式计算数量。

【分析】

（1）由于嗜热菌耐高温，能在热泉中存活，所以产生高温淀粉酶的嗜热菌能从热泉中被筛选出来。

（2）根据题图可知：X为淀粉，Ⅱ号培养基为固体培养基，所以Y为琼脂（凝固剂），I、Ⅱ号培养基均属于选择培养基。

（3）I号培养基接种后需放在摇床重振荡培养的目的是供应微生物所需氧气，同时使营养物质与菌体充分接触，扩大培养；根据题意可知：该嗜热菌是从热菜中提取的，所以应调整温度为80℃；同一种微生物在培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色应相同。

（4）对菌体进行计数的方法一般采用稀释涂布平板法，步骤为：取嗜热样品并加入一定量的无菌水稀释，涂布到选择培养基上（至少3个），培养一段时间后，选择菌落数为30～300的平板统计，再根据公式计算数量。

2．为筛选出优良的纤维素酶产生菌，某科研团队从腐木、腐土、腐叶等样品中采集微生物，配置马铃薯琼脂培养基和羧甲基纤维素琼脂培养基（后者的配方如下表），分别用于初筛和复筛，最终分离、纯化得到降解纤维素能力较强的木霉株（T-1）和青霉株（P-1，P-2）。回答下列问题：

物质

质量或体积

物质

质量或体积

羧甲基纤维素钠

10g

琼脂

20g

(NH4)2SO4

4g

蒸馏水

1000mL

KH2PO4

2g

MgSO4·7H2O

0．5g

（1）表中的培养基为___________（填“固体”或“液体”）培养基，为微生物提供碳源的物质是___________。从功能上分析，该培养基属于___________培养基。

（2）筛选产纤维素酶的微生物时，常用的染料是___________，最终选择___________的菌落挑取菌种，进一步纯化。

（3）β-葡萄糖苷酶是一种纤维素酶，能将纤维二糖分解为___________。为了探究T-1、P-1、P-2这3株霉菌产生β-葡萄糖苷酶的活性选用甘蔗渣作为碳源的发酵产酶培养基，以水杨素（一种纤维二糖）作为酶促反应底物，写出简要实验思路：_____________________________。

【答案】（1）固体羧甲基纤维素钠选择

（2）刚果红周围出现透明圈

（3）葡萄糖（单糖）将3株霉菌分别接种到相同发酵产酶培养基中单独产酶，各取相同体积的酶液，加入等体积的水杨素分别进行反应，测量单位时间内水杨素的减少量或葡萄糖的增加量

【分析】

（1）由表可知该培养基加入了琼脂（凝固剂），因此为固体培养基。由题干信息分析可知，该实验的目的是筛选出优良的纤维素酶产生菌，故培养基中应选择纤维素类物质作为唯一的碳源，故表中的羧甲基纤维素钠主要为微生物生长提供碳源，该培养基允许能够分解纤维素的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物的生长，从功能上分析，该培养基属于选择培养基。

（2）复筛的过程中，在培养基中添加适量的刚果红染料，刚果红染料可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，最后根据菌落是否产生透明圈，可筛选出分解纤维素的霉菌。

（3）β-葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解为葡萄糖。为了探究T-1、P-1、P-