微生物学-主讲教师 微生物教学团队 -1766128761058.pptxVIP

主讲教师——微生物教学团队

实训体外抗菌测定技术

CONTENT

一实训目的

二实训原理

三材料和用具

四操作步骤

五注意事项

3六思考题

实训

知识目标：掌握体外抗菌试验常用方法。

技能目标：能够进行常用体外抗菌试验的常用方法。

思政目标：树立科学严谨的职业态度。

技能重点：管蝶法。

技能难点：样品的稀释。

实训目的

一

实训

一、实训目的

1、掌握体外抗菌技术的方法

2、掌握琼脂扩散法和联合抗菌试验技术

实训原理

二

实训

琼脂扩散法是利用药物可以在琼脂培养基中扩散，并在一定浓度范围内抑制细菌生长

的原理。

材料和用具

三

实训

三、材料和用具

（一）培养基

普通琼脂培养基。

（二）菌种：金黄色葡萄球菌培养液、大肠杆菌培养液

（三）仪器器皿

培养皿、滴管、镊子、无菌滤纸片、0.1%新洁尔灭、0.9%生理盐水等

操作步骤

四

实训四、操作步骤

（一）滤纸片法

测定几种抗生素的抑菌效果。以一

定直径（6-8mm）的无菌滤纸片，

蘸取一定浓度的被检药液，将其紧

贴在含菌平板上，如果纸片上含有

药液，便会沿琼脂向四周扩散，且

对该试验菌有抑制作用，经一定时

间培养后，就可在滤纸片周围形成

不长菌的透明圈。

实训四、操作步骤

（二）挖沟法

1.试验菌株的培养---金黄色葡萄球菌、

大肠杆菌、绿脓杆菌；

2.制备无菌平板---熔化并冷却至50℃

左右的琼脂培养基每皿约20ml；

3.挖沟---在平板中央；

4.接种试验菌---在沟槽两侧垂直划线

接种各试验菌株；

5.加药、培养---将半流动药物或中药

液用无菌吸管或直接加入沟内，30-

35℃培养箱中培养24-48h后观察结果。

实训四、操作步骤

（三）纸条法

在含菌平板上垂直放置两条浸有不同

药液的滤纸条，培养后观察两药形成

无关无关

的抑菌区的图形来判断两药联合应用

时是无关、拮抗或协同作用。

协同拮抗

实训四、操作步骤

（四）管蝶法

本法系利用抗生素在脂培养基内的扩散作用，比较标准品与供试品两者对接种的

试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法，

注意事项

五

实训

五、注意事项

接种时规范使用酒精灯，接种过程、环境、器皿要

（一）注意安全。（二）求无菌。

操作结束后养成清场的职

滴加药液不能溢出。

（三）（四）业习惯。

思考题

六

实训

化学药物对微生物

所形成的抑菌圈未

长菌部分是否说明

抗生素有哪几种思考题

微生物已经被杀死？

联合抗菌效果？

如何通过实验加以