临床免疫功能检测.pptVIP

人体免疫功能的检测;第一节免疫应答的类型及组成

免疫应答分两种类型

一.非特异性免疫应答

二.特异性免疫应答;一.非特异性免疫应答（固有性免疫应答，innateimmuneresponse)

（一）概念先天获得，无个体差异

（二）特点

1.起作用迅速

2.先天获得

3.无个体差异

4.不因同一抗原进入机体次数多少改变反应强弱;二.特异性免疫应答（适应性免疫应答，adaptiveimmuneresponse)

（一）概念后天因抗原刺激获得

（二）特点

1.后天获得

2.免疫发生时间因首次或再次接触抗原而不同

3.有个体差异

4.免疫发生强弱与抗原进入次数有关

;（三）组成

细胞免疫：由T细胞主导完成

体液免疫：由B细胞主导完成;第二节人体免疫功能检测;人特异免疫功能的检测

一.T细胞数量的检测

二.T细胞功能的检测

三.B细胞数量的检测

四.B细胞功能的检测;T细胞表面主要CD抗原及其特异性

CD抗原特异性

CD2E受体、全部T细胞和部分NK细胞

CD3成熟T细胞

CD4T（辅助/诱导）细胞、M?、HIV受体

CD8T（杀伤/抑制）细胞、NK细胞的亚型

CD25活化T细胞、IL-2受体

;检测T细胞方法：

用标记的抗CD抗原的单克隆抗体检测

1.间接免疫荧光法：用荧光素标记的单抗作为

试剂染色淋巴细胞，计算出染上荧光的淋巴细

胞百分率

如：荧光标记的抗CD4淋巴细胞

染上荧光的细胞为CD4+细胞;3.抗体致敏细胞花环法

用相应单抗致敏红细胞（单抗结合到红细胞表面），与淋巴细胞混合

有相应抗原的T细胞周围可吸附红细胞，形成花环;（二）T细胞特异性受体（E受体）的检测

E花环形成试验(ErythrocyteRosetteformingtest)

原理：

T淋巴细胞表面有绵羊红细胞（SRBC)受体，当淋巴细胞与绵羊红细胞混合时，T细胞通过该受体吸附绵羊红细胞，形成的花环。

E:erythrocyte,红细胞;;E花环形成试验据实验条件不同又分两种：

Et花环形成试验（total,总E花环）

Ea花环形成试验（active,活性E花环）

;1.Et花环形成试验

淋巴细胞+SRBC(1:20~50)37°C、5分钟低速离心4°C、2hor过夜

形成花环的百分率

意义：

表示总T细胞数量（凡是T细胞均能形成

花环），数量低于正常，说明细胞免疫功能

不好。

正常值：60%~80%;（三）T细胞的?-醋酸萘酯酶测定

(?-acidnaphthylacetateesterase,ANAE)

成熟的T细胞中富含ANAE

?-醋酸萘酯醋酸+萘酚

红色沉淀暗红色

该试验将T淋巴细胞染成暗红色。正常值60~80%;二.T细胞功能的检测

反映机体细胞免疫功正常，除了要T淋巴细胞数量正常外，还要T细胞功能正常。

检测T细胞功能正常的试验有：

（一）淋巴细胞转化试验

（二）相关的细胞因子的检测（在细胞因子章节介绍）

（三）淋巴细胞的细胞毒性检测;2.刺激物

一般为有丝分裂原和抗原

分两类

（1）非抗原刺激物（有丝分裂原）

可刺激相关的一类淋巴细胞发生转化，与机体是否已曾受过某一抗原致敏无关。常有：

;非抗原刺激物

刺激物能刺激发生转化细胞

植物血凝素T

(phytohemagglutinin,PHA)

刀豆素AT

(ConcanavalinA,ConA)

脂多糖(LPS)B

美洲商陆(PWM)