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分子植物病理学

(导论)

MolecularPlantPathology

(introduction);课程性质与教学目的

;分子植物病理学在病理学中的地位;植物病理学的发展紧跟生物科学的发展,从认识病害开始,经历了症状学(Symptomatology)、病原学(plantaetiology)、寄主和病原物相互作用的遗传学(geneticsoftheinteractionbetweenhostandpathogen)、病理生理和生化(PathologicalPhysiologyandBiochemistry),直至进入了分子病理学阶段。

从而把病害的表型与病原和寄主的基因及表达联系起来。;2.研究内容(contents);;3.主要研究方法(mainstrategy)

◆从“里”到“外”:以研究寄主和病原物的基因为主要对象,阐明寄主-病原物相互作用的有关基因的结构、表达、调控及其产物功能。(传统植物病理学从外到里)。

◆方法导向:先以分子克隆的方法鉴定与致病性有关的基因,然后根据该基因产物及其对生物表型的影响,确定该基因的类型和作用。(传统植物病理学为概念导向)

◆在分子(DNA)水平上通过互补分析和缺失研究,从个体到群体分析有关基因的作用和功能表现的调节。(传统植物病理学则多采用比较研究的方法)。;主要章节与内容;

由于各种病原物的分类地位及其所从属的学科不同,因此,在各种植物病害的研究中,运用分子植物病理学观点和方法对其进行研究的水平是不平衡的。;1955~1956,H.Frankel-Conrat对TMV的蛋白质和核酸进行了重组研究,为证明核酸作为一种遗传物质的作用提出了令人信服的证据.(病毒分子病理研究经典之作);5.2植物细菌病害的分子生物学研究

植物病原细菌中欧氏杆菌归属于肠杆菌科,这类病原菌的分子遗传研究在20世纪70年代初才开始,较肺炎双球菌的分子遗传学研究迟了近40年,较DNA双螺旋的发现晚了将近20年。

20世纪50~70年代是植物病原细菌基因操作技术积累的时期。

1953~1956,D.T.Klein﹠R.M.Klein发现根癌土壤杆菌的基因转化与致病性有关的现象。

1957,R.R.Corey﹠M.P.Starr发现了菜豆黄单胞的转化作用与其对链霉素抗性和菌落形态变化之间的关系。

1966,日本学者完成了水稻白叶枯病菌的转化研究。;欧氏???菌(Erwiniaspp);自1984年N.T.Keen首次报道从菊欧氏杆菌(E.Chrysanthemi)中克隆到果胶裂解酶基因后,发表了有关欧氏杆菌中2个种pel基因克隆的报道,其中涉及编码5个主要同工酶的5个pel基因.

;农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)

1944,发现农杆菌侵染的植物组织可以在不加激素的培养基上生长。

1970,G.Moreletal.发现农杆菌致病菌有两种类型,其区别在于对两种不常见Arg衍生物章鱼碱(octopine)和胭脂碱(nopaline)的代谢不同。

1973,J.A.Lippincoot证明,无致病力菌株丧失对上述两种Arg衍生物的利用能力,因此,农杆菌有3种类型。;假单胞细菌(Pseudomonas.spp.)

;5.3植物真菌病害的分子生物学研究;6分子植物病理学的研究进展和发展趋势;GeneforGeneHypothesis;Gene-for-gene(race-specific)interactions(Florin1956);;6.3病原无毒基因及其进展;植物病原细菌无毒基因的研究;应用植物基因工程技术将具有能激活植物自身防御系统的无毒基因与适合于植物背景、非专一性的病原物诱导启动子组合成嵌合基因构建到植物表达载体中。通过农杆菌或基因枪的介导转化植物,可筛选出高效广谱的抗真菌和细菌病害的转基因植株。

杨希才等(2001)从病原细菌PseudomonassyringaePV.tomato中获得的无毒基因avrD(0.93kb)和从病原真菌Phytophthoraparasitica中获得的无毒基因Elicitin(0.294kb)分别与非专一性病原物诱导启动子Pill和BG组成含2个嵌合基因(Pill-avrD,BG-Elicitin)的植物表达载体pYH144和pYHEt。通过农杆菌LBA4404介导转化马铃薯,其中用pYH144载体转化2个品种(克新1号,2号),用pY

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