紫外-可见分光光度法测定操作规程.docVIP

XXX-XX-XX-000紫外-可见分光光度法测定操作规程PagePAGE6ofNUMPAGES6

操作标准

文件名称

紫外-可见分光光度法测定操作规程

起草人

起草日期

年月日

审核人

审核日期

年月日

质量部审核人

审核日期

年月日

批准人

批准日期

年月日

颁发部门

质量部

生效日期

年月日

分发部门

总经理[]份质量部[]份生产部[]份EHS管理部[]份

工程部[]份物资部[]份动物实验室[]份中药提取车间[]份

商务部[]份仓储[]份药物警戒部[]份质量控制实验室[]份

财务部[]份行政部[]份技术研发部[]份大容量注射剂车间[]份

变更内容

修订号修订原因与内容执行日期

01年月日

1目的

建立紫外-可见分光光度法测定操作规程，确保实验结果的准确性。

2适用范围

本规程用于紫外-可见分光光度法测定。

3引用标准

《中国药典》

《中国药品检验标准操作规范》

4职责

质量控制实验室：按照应用标准制定该操作规程。

质量部QA：负责该操作规程的审核。

质量部经理：负责该操作规程的批准。

术语与定义

紫外-可见分光光度法

是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。

当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可用通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质，用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算处样品溶液的浓度。

内容

6.1仪器的校正和检定

6.1.1波长

由于环境因素和机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正。常使用高氯酸钬溶液校正双光束仪器，一10%高氯酸溶液为溶剂，配制含氧化钬（Ho2O3）4%的溶液，该通用的吸收峰波长为241.13nm，278.10nm，287.18nm，333.44nm，345.47nm，361.31nm，416.28nm，451.30nm，485.29nm，536.64nm和640.52nm。

波长准确度的允差范围

紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差，紫外区为±1nm，500nm处±2nm。

吸光度的准确度

可用的重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。

波长∕nm

235（最小）

257（最大）

313（最小）

350（最大）

吸收系数

的规定值

124.5

144.0

48.6

106.6

吸收系数

的许可范围

123.0~126.0

142.8～146.2

47.0～50.3

105.5～108.5

杂散光的检查

可按下表所列的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。

试剂

浓度∕℅(g/ml)

测定用波长∕nm

透光率℅

碘化钠

亚硝酸钠

1.00

5.00

220

340

﹤0.8

﹤0.8

对溶剂的要求

含有杂原子的有机溶剂，通常均具有很强的末端吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如，甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外，当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。因此，在测定供试品前，应先检查所有的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即将溶剂置1cm石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质