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尿液干化学分析仪和尿沉渣分析仪检测原理及日常工作一般注意事项
尿液分析仪是测定尿中某些化学成分的自动化仪器,它是医学实验室尿液自动化检查的重要工具,此种仪器具有操作简单、快速等优点
尿分析仪一般用微电脑控制,采用球面积分仪接受双波长反射光的方式测定试剂带上的颜色变化进行半定量测定。试剂带上有数个含各种试剂的试剂垫,各自与尿中相应成分进行独立反应,而显示不同颜色,颜色的深浅与尿液中某种成分浓度成正比例关系,试剂带中还有另一个“补偿垫”,作为尿液本底颜色,对有色尿及仪器变化等所产生的误差进行补偿。
仪器按公式自动化计算出反射率,然后与标准曲线比较,自动打印出各种成分的相应结果
本院临检室用的尿十项检测项目包括尿比密、PH、尿白细胞、亚硝盐、蛋白、葡萄糖、酮体、胆红素、尿胆原、隐血(红细胞)
1、尿PH检查:结果有二重含义:①反映体内酸碱代谢状态。②由于尿蛋白、尿比密的测定原理是基于膜介上最后PH试剂的颜色变化,因此分析PH变化还有监控尿PH变化对其它膜介区反应的干扰作用
2、尿比密检查:试剂条中的多聚电解质含有随尿标本中离子浓度则解离的酸性基团,离子越多,酸性基团解离子越多,而使膜介中的PH改变,这种改变可由膜块中的酸碱性指示剂的颜色变化显示出来,进而换算成尿液的比密值
4、尿葡萄糖测定:尿试带法测定尿葡萄糖是采用酶法。其膜块中含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和色原。
6、尿胆红素、尿胆原检查:尿胆红素测定原理是结合胆红素在强酸性介质中,与2,4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色;测定尿胆原的原理与改良Ehrlich法相同。
8、尿白细胞检查:尿试带法检查尿内白细胞的原理基于中性粒细胞胞质内含有特异性酯酶,可作用于膜块中的吲哚酚酯,与重氮盐反应形成紫色缩合物,其颜色深浅与中性粒细胞的多少呈正比例关系。
9、尿血红蛋白、尿红细胞检查:膜块中主要含有过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴和色原(如邻甲联苯胺)两种物质。其原理为尿液中红细胞内的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茄香素或过氧化氢烯钴分解出[0],后者能氧化有关色原(如邻甲联苯胺)使之呈色。
尿液干化学法注意事项1、尿试带法简单、快速、用尿量少,但由于试纸法尿比密结果间隔较大,不能反应细微的比密变化,故不能用于浓缩稀释试验。试带法对高或过低的尿比密均不敏感,故不宜用于这两种情况,如新生儿尿就不适用。因此只能用于一般性筛选,在上述情况下以折射仪更为理想。
2、干化学法测定尿蛋白操作简单快速,但在使用应注意:①病人服用奎宁和磺胺嘧啶等药物引起的强碱性尿时,会使干化学法出现假阳性结果而磺基水杨酸法出现假阴性结果。可用稀乙酸将尿液PH调5~7,再行实验,借以区别是否由于强碱性尿而导致假阳性。
②研究证明几十种药物可使尿蛋白检查出现假阳性,有学者对用大剂量青霉素患者给药前后进行了尿蛋白的检测,结果表明:滴注250万单位组2小时/320万单位3组小时,480万单位组5小时可能对磺基水杨酸法产生假阳性,对干化学法产生假阴性。
④标本内含有其它分泌物(如生殖系统分泌物)或含有较多细胞成分时,可引起假阳性。
3、尿葡萄糖测定使用中应注意:①尿试带法与班氏定性法的特异性不同,前者的特异性强,仅与葡萄糖反应;而后者与尿内糖和所有还原性物质都反应,故在尿试带法呈阴性的标本有可能在班氏法呈阳性结果。
③干扰物质对两法的影响不同:尿液内含有对氧亲和力较强的还原物质可与班氏法中的铜离子作用产生假阳性,但却可使干化学法试带产生的H2O2还原显色而使其成假阴性。排除的方法是先将尿液煮沸几分钟破坏维生素C再进行实验。现已有含维生素C氧化酶的试带的可以排除这一干扰。
④干化学法测定尿葡萄糖只是一般的半定量试验,它所设计的浓度水平与传统的班氏存在的着差异,二者有可相互比较,因此对于糖尿病的动态观察,在干化学出现阳性结果时,最好用湿化学定量方法,以确立准确的尿葡萄糖范围或收集昼夜尿标本作尿糖定量。
②干学法与酮体粉法灵敏度存在差异:酮体粉法对乙酰乙酸与丙酮的敏感性分别为80mg/L和100mg/L。不如试带法敏感,故同一病理标本两种方法可能出现结果的差异,分析结果时应特别注意。
③不同病因引起的酮症,酮体的成分不同,即使一病人不同病程也可有差异,例如在糖尿病酮症酸中毒早期,主要酮体成分β-羟丁酸,很少或缺乏乙酰乙酸,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,β-羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高,易对病情估计过重。因此检验人员必须注意病程发展,与临床医生共同分析实验结果。
5、尿胆红素、尿胆原检查两个方法主要注意点为:①标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素;尿胆原在氧化成尿胆素。②尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时,抑制偶氮反应使
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