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;答案:;1.完善实验原理及步骤;突破考点·提炼技法;(1)在物质鉴定实验中应注意选择无色或颜色浅的材料,这样可以避免材料本身的颜色掩盖反应结果,如鉴定还原糖一般不用有色的叶片,鉴定蛋白质一般不用血红蛋白等。;突破考点·提炼技法;突破考点·提炼技法;突破考点·提炼技法;突破考点·提炼技法;?
考点三检测生物组织中的还原糖、脂质和蛋
白质;2.实验材料;考纲解读;(2)脂肪的检测与观察;(3)蛋白质的检测与观察;①可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是还原糖含
量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,易于观察。;鉴定成分;一、实验原理
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。;二.实验材料:
1、做可溶性还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色或近白色的的植物组织,如苹果、梨(因为组织的颜色较浅,易于观察)。
2、做脂肪的鉴定实验,应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清(必须稀释,蛋白质会与双缩脲试剂发生反应后粘固在试管壁上,使反应不容易彻底并且试管也不易清洗干净)。;比较项目;四、实验流程:
1.还原糖的检测和观察:;结论:还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有还原糖。
注:溶液颜色的变化过程为浅蓝色―→棕色―→砖红色;3.蛋白质的检测和观察:
选材与制备:鸡蛋清稀释液或黄豆浆滤液
结论:说明组织样液中存在蛋白质;4.淀粉的检测和观察;鉴定物质;;想一想:①使用方法不同:斐林试剂的甲液和乙液要混合均匀后方可使用,而且是现用现配,而双缩脲试剂在使用时,先加A液后加B液。②处理方式不同:斐林试剂加入组织样液后需水浴加热方可反应,而双缩脲试剂加入组织样液后不需加热即可反应。
答案:斐林试剂与双缩脲试剂在使用上有何主要不同?;检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、实验原理
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。
1. 糖类
2. 脂肪+苏丹Ⅲ染液―→橘黄色
脂肪+苏丹Ⅳ染液―→红色
3. 蛋白质+双缩脲试剂―→紫色;二、实验流程图示
先根据选材预测实验结果,然后再实验验证,因此本实验属验证性实验。;可溶性还原糖的鉴定:制备组织样液(提取或分离出含还原性糖的过程)
↓
鉴定样液(取样液2mL于试管中→加刚配的斐林(班氏)试剂2mL→水浴2min左右→观察颜色变化)
蛋白质的鉴定:制备样液(制备豆浆或稀释蛋清)
↓
鉴定(试管中加样液2mL→加2mL双缩脲试剂A摇均→双缩脲试剂B试剂3~4滴摇均→观察颜色变化);脂肪的鉴定:制作切片(含脂肪量越高的组织越好,切片越薄越好)
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1~2水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察)
总结:三大类物质的鉴定步骤都是:取样→颜色反应→观察鉴定,但可溶性还原糖鉴定要水浴加热,脂肪鉴定要洗去浮色后制片再用显微镜观察,蛋白质鉴定要先加双缩脲试剂A液(质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液),后加B液(质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液)。;1.还原糖的检测和观察;方法二:;3.蛋白质的检测和观察;三、实验注意的问题
(1)在鉴定脂肪的实验中
①装片制作方法可按教材所述,也可用左手拇指与食指垂直捏压子叶下端,右手拿刀片横向切割,切片可很薄。
②用苏丹Ⅲ染液染色时间不宜过长。
(2)做鉴定还原糖和蛋白质的实验时,在鉴定之前,可以留出
一部分样液,以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比,这样
可以增强说服力。
(3)蛋白质要稀释主要是防止蛋白质与双缩脲反应后粘固
在试管壁上,使反应不彻底,也不易洗刷试管。;四、斐林试剂与双缩脲试剂比较;(1)浓度不同。斐林试剂中CuSO4溶液浓度为0.05g/mL,双缩脲试
剂中C
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