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【PCR仪】PCR仪的维护PCR仪维护和修理保养

1993年美国科学家Mulis众望所归地获得了诺贝尔化学奖，他所取得的成就是制造了PCR技术。如今，PCR技术已经被广泛地应用于生命科学讨论、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面。然而，PCR技术的进展离不开PCR扩增仪。可以说，没有PCR扩增仪就没有PCR技术。

PCR仪是利用升温使DNA变性，用限制性内切酶使DNA双链解链，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制的目的。

PCR仪的维护

1、样品池的清洗

先打开盖子，然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min，然后清洗被污染的孔。用微量移液器吸取液体，用棉签吸干剩余液体。打开PCR仪，设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行，让残余液体挥发去除，一般5～10min即可。

2、热盖的清洗

对于荧光定量PCR仪，当有荧光污染显现，且这一污染并非来自样品池时，或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时，需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面，确保样品池的孔干净，无污物阻拦光路。

3、仪器外表面的清洗

清洗仪器的外表面可除去灰尘和油脂，但达不到消毒的效果。选择没有腐蚀性的清洗剂对PCR仪的外表面进行清洗。

4、更换保险丝

先将PCR仪关机，拔去插头，打开电源插口旁边的保险盒，换上备用的保险丝，察看是否恢复正常。

5、定期检测

视制冷方式而定一般半年至少一次，当PCR仪的降温过程超过60s，就应当检查仪器的制冷系统，对风冷制冷的PCR仪要较彻底地清理反应底座的灰尘，对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。

PCR仪的种类

PCR扩增仪和实时荧光定量PCR仪，一般的PCR扩增仪又衍生出带梯度PCR功能的梯度PCR仪和带原位扩增功能的原位PCR仪等等。

梯度PCR仪

一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称之为梯度PCR仪。由于被扩增的不同的DNApian段其比较适合的退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的比较适合退火温度进行有效的扩增。紧要用于讨论未知DNA退火温度的扩增，这样既节省时间，也节省经费。在不设置梯度的情况下亦可当做一般的PCR用。正真的梯度，是每一排管都有精准明确的加热控温探头，2023年为止只有美国ABI公司可以做到。其他的都是从两头的热传递来设计控温。梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。

原位PCR仪

是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。如病原基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。可保持细胞或组织的完整性，使PCR反应体系渗透到组织和细胞中，在细胞的靶DNA所在的位置进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA，还能标出靶序列在细胞内的位置。于分子和细胞水平上讨论疾病的发病机理和临床过程及病理的变化有侧重点的应用价值。

实时荧光定量PCR仪

在一般PCR仪设计基础上加添荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统，形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和一般PCR扩增原理相同，在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记，使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统，得出量化的实时结果输出。

荧光定量PCR仪有单通道，双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候，选用单通道；有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物，由于一次只能检测一种目的基因的扩增量，需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，实现一次检测多种目的基因的功能。

实时荧光定量PCR仪紧要应用于临床医学检测、生物医药研发、食德行业、科研院校等。