专题九第一讲微生物的利用.pptVIP

微生物的营养、分离与计数

1.微生物的营养;拓展提升

1.微生物培养技术中的消毒和灭菌;3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基;一、微生物的基本技术

1.制备培养基：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

2.无菌技术：主要指消毒和灭菌。

3.倒平板操作：待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板。

4.微生物接种技术：（1）平板划线操作：平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。;注

意

事

项;a.实验原理

即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

b.流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。;①平板划线法适用于微生物的纯化，但不能用于微生物的计数。

②稀释涂布平板法常用于活菌计数法，而显微镜直接计数法不能区分细菌的死活。用稀释涂布平板法进行计数时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。;2．配制培养基时应注意哪些问题？

(1)全程要求无菌操作。

(2)培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。操作时使锥形瓶的瓶口通过火焰，通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。;;知识点1：微生物的实验室培养

【例1】(2010·合肥二模)用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()

①可以用相同的培养基

②都需要使用接种针进行接种

③都需要在火焰旁进行接种

④都可以用来计数活菌

A．①②B．③④

C．①③D．②④;【举一反三】消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理()

①皮肤②饮用水

③牛奶④注射器

⑤培养皿⑥接种环

⑦培养基⑧果汁

⑨酱油⑩手术刀

A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩

C．①②④⑤⑥⑧D．以上全部;【举一反三】(2010·盐城一模)尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们为探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：;KH2PO4;答案②⑤⑥;(4)转到固体培养基上时，常采用________________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)下列材料或用具：①培养细菌用的培养基与培养皿，②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管，③实验操作者的双手。其中需要灭菌的是________；需要消毒的是________。(填序号)

(6)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：__________________________________________

_________________________________________

_____________________________________。;无氧;毛霉、酵母、青霉、曲霉;纤维素分解菌;倒置;B;多聚酶链式反应扩增DNA片段

1．生物体内DNA复制与PCR反应的比较;条件;（3）结果

①PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都要包括变性、复性、延伸三步。

②两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。;3.什么是3′端和5′端？DNA复制为什么需要引物？

为了明确地表示DNA的方向，通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3′端，而含磷酸基团的末端称为5′端；一个双链DNA分子中含2个3′端和2个5′端，如果一条链的方向是3′→5′，则另一条链的方向就是5′→3′，这就是反向平行的含意。

DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。PCR实验中，引物长度通常为20～30个核苷酸。;知识点：多聚酶链式反应(PCR)扩增DNA片段

【例】(2010·盐城五校联考)多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般要经历30多次下述循环：95℃条件下使模板DNA变性、解链→55℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，不正确的是();A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也