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检验科生物安全手册最新版

检验科生物安全管理是保障人员健康、防止病原微生物扩散、确保检测结果准确性的核心工作。本手册依据《病原微生物实验室生物安全管理条例》《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2022）及行业最新规范编制，适用于开展临床检验、分子生物学检测、微生物培养鉴定等工作的所有实验室区域及相关人员，涵盖样本接收、处理、检测、保存、废弃物处置等全流程管理要求。

一、生物危害风险评估与分级管理

实验室应针对日常检测项目、操作流程及潜在风险开展动态生物危害评估，评估内容包括但不限于：样本类型（如血液、体液、分泌物等临床标本，或含已知/未知病原微生物的培养物）、操作强度（如离心、匀浆、接种等高风险操作）、防护措施有效性（如生物安全柜性能、个人防护装备适配性）。评估由实验室生物安全委员会组织，至少每年度更新一次，新增检测项目或操作流程变更时需重新评估。

根据风险等级，实验室划分为BSL-1（基础生物安全实验室）、BSL-2（加强型生物安全实验室）和BSL-3（防护型生物安全实验室）。检验科常规开展的临床检测（如血常规、生化分析）应在BSL-1或BSL-2实验室进行；涉及结核分枝杆菌、肝炎病毒等二类病原微生物的检测需在BSL-2实验室完成，且需配备生物安全柜、高压蒸汽灭菌器等核心设备；开展高致病性病原微生物检测时，需严格符合BSL-3实验室要求并取得相关资质。

二、个人生物安全防护要求

所有进入实验室的人员（包括检验人员、进修生、实习生、清洁人员等）必须穿戴符合要求的个人防护装备（PPE），具体标准如下：

1.基础防护：在BSL-1实验室或非实验操作区域（如样本接收区、办公区），需穿着长袖工作服、戴工作帽，接触样本时佩戴一次性乳胶手套（无破损、无过期）。

2.加强防护：在BSL-2实验室进行样本处理（如离心、开盖、移液）、微生物接种等操作时，需额外佩戴防渗透一次性防护服（或防水隔离衣）、护目镜（防冲击型）及N95/KN95口罩（或医用外科口罩+面罩组合）。处理可能产生气溶胶的操作（如超声破碎、涡旋振荡）时，必须在Ⅱ级生物安全柜内进行，并关闭实验室门窗。

3.特殊防护：接触高风险样本（如HIV阳性、活动性结核样本）或开展动物实验相关操作时，需穿戴连体式防渗透防护服、双层手套（内层乳胶/外层丁腈）、正压式呼吸防护装置（如PAPR），并在独立缓冲间完成穿脱。

PPE穿脱需遵循“污染区→半污染区→清洁区”的单向流程，避免交叉污染：穿脱前需确认操作区域无样本暴露；穿戴时先戴口罩（调整鼻夹贴合），再穿防护服（拉紧扣带），最后戴手套（覆盖防护服袖口）；脱卸时先摘手套（外翻包裹污染面朝内），再脱防护服（避免接触外层污染面），最后摘口罩（手不触碰口罩外表面），每一步完成后立即用速干手消毒剂（含75%乙醇）进行手卫生。

三、样本全流程生物安全操作规范

（一）样本接收与运输

外部送检样本需由专用密封容器（如防泄漏转运箱）运输，容器外需标注“生物危害”警示标识（符合GB190-2009）及样本信息（姓名、编号、检测项目）。接收时需核对样本数量、标识完整性及包装状态，发现泄漏、破损或无明确标识的样本应拒绝接收，并立即用含有效氯1000mg/L的消毒液对污染区域进行覆盖消毒（作用30分钟后清理）。内部转运样本时，需使用带盖离心管或密封瓶，避免在非实验区域（如走廊、电梯）长时间停留。

（二）样本处理与检测

1.前处理操作：样本离心需使用带螺旋盖的离心管（容量不超过80%），预平衡误差≤0.1g；离心机需放置于生物安全柜内或实验室核心操作区，启动前确认转子盖闭合，运行时避免频繁开启机盖。若离心过程中发生管破裂，需待离心机完全停止后静置30分钟（减少气溶胶扩散），佩戴双层手套用镊子取出破损管，用吸水纸覆盖泄漏物，倾倒含有效氯2000mg/L的消毒液（覆盖面积扩大10cm），作用30分钟后清理，废弃离心管放入锐器盒。

2.微生物检测：接种平板、涂片染色等操作必须在Ⅱ级生物安全柜内进行，操作前需用75%乙醇擦拭台面，紫外线消毒30分钟（使用后关闭）；火焰灭菌接种环时，需远离样本区，避免气溶胶扩散；培养物转移需使用密封运输盒，标注“高风险生物样本”。

3.分子生物学检测：提取核酸时，需在独立的样本处理区（与扩增区、产物分析区物理分隔）进行，移液器需配备防气溶胶吸头（带滤芯），避免交叉污染；使用后的一次性耗材（如吸头、离心管）需及时放入感染性废物袋，禁止重复使用。

（三）样本保存与销毁

检测后样本需按《医疗机构临床检验项目目录》要求保存，普通生化、免疫样本保存时间≥7天，微生物培养物保存时间≥30天（特殊病原按法规延长）。保存样本需放置于专用冰箱（标识“生物样本保存”）