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摘要
扬子鳄嗅觉微量胺相关受体(TAARs)的分子特征、定位及表达
摘要
嗅觉器官是动物寻找食物、发现捕食者和猎物以及标记领地的主要感官,动物
借嗅觉进行捕食、躲避天敌、繁殖期间求偶以及繁育幼体等。嗅觉感受主要通过主
要嗅上皮上的嗅觉受体感知气味分子再广泛投射到更深层次的大脑结构,从而产生
嗅觉。而嗅觉受体又主要分为气味受体(Olfactoryreceptors,ORs)家族和微量胺相关受
体(Traceamine-associatedreceptors,TAARs)家族等。本论文研究的TAAR2和TAAR5
就是微量胺相关受体家族(TAAR)的Ⅱ类成员,只有Ⅱ类成员在四足动物和硬骨类动物
中都具有嗅觉功能,且在气味偏好图谱中,TAAR2更倾向于伯胺,而TAAR5更倾
向于叔胺,均比较有代表性,因此对它们进行分子特征及表达的研究具有重要意义。
本研究采用生物信息学分析技术,对扬子鳄TAAR2基因和TAAR5基因进行分子特
HEPCR
征方面分析的基础上,结合染色、免疫组织化学研究及实时荧光定量技术,
研究TAAR2蛋白和TAAR5蛋白在扬子鳄嗅上皮、嗅球、嗅束、大脑、中脑、小脑、
延脑及垂体中的定位及mRNA相对表达量分析的测定。研究结果表明:TAAR2基因
3432TAAR27
编码个氨基酸,有个开放阅读框,蛋白无信号肽,有个跨膜区,具
有6个磷酸化位点,为疏水性GPCRs跨膜蛋白;TAAR5基因编码331个氨基酸,
有1个开放阅读框,TAAR5蛋白无信号肽,有7个跨膜区,具有10个磷酸化位点,
GPCRsTAAR2TAAR5CDs
同样为疏水性跨膜蛋白;同时,对和区核苷酸序列进行
多重序列比对并构建邻接法系统发育树,发现它们在脊椎动物中相对保守,并且作
为鳄类动物与鸟类亲缘关系最近,而与哺乳纲关系更远。免疫组织学研究表明,
TAAR2蛋白和TAAR5蛋白均在嗅上皮的嗅觉感觉神经元的细胞及其顶端的嗅觉纤
毛和支持细胞的细胞中有明显表达,在嗅球的细胞和传出纤维中有明显免疫反应,
在嗅束的嗅前核及海马皮质的细胞和传出纤维中有明显表达,在大脑的皮质及部分
髓质纤维中有所表达,在垂体的腺垂体和神经垂体的细胞中均有部分的阳性表达,
在延脑的部分细胞核团和神经纤维束中可见阳性反应,在中脑的视叶皮质的细胞中
有部分阳性表达,小脑阳性表达在外部皮质和内部髓质的部分细胞中。实时荧光定
PCRTAAR2TAAR5
量分析表明和均在扬子鳄嗅上皮中相对表达量最高,其次是嗅
球,而在嗅束、大脑、中脑、小脑、延脑和垂体中均有微量表达。
研究表明,TAAR2基因和TAAR5基因受体在扬子鳄的嗅觉相关器官中的分布
及相对含量具有很多的共同点,这可能是因为它们均是TAARs家族中的亚成员,且
在扬子鳄嗅觉器官中均起到嗅觉受体的作用。同时推测TAAR2和TAAR5在嗅觉相
I
摘要
关组织中不仅仅只是作为单一的嗅觉受体发挥作用,可能在脑组织中作为一种脑单
胺能神经递质调节剂,在中枢神经系统中发挥一种潜在的异位功能。该研究通过对
扬子鳄嗅觉受体及其表达部位的研究,为扬子鳄TAARs家族其他嗅觉受体的研究提
供了基础数据,并且为嗅觉受体的进一步深入研究打下了基础。
TAARsTAAR2TAAR5
关键词:扬子鳄;嗅觉微量胺相关受体;;;;实时荧光
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