CN114478195B 一种从微生物发酵产物中提取大麻萜酚的方法 （北京蓝晶微生物科技有限公司）.docxVIP

(19)国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN114478195B(45)授权公告日2022.07.29

(21)申请号202210402502.1

(22)申请日2022.04.18

(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN114478195A

CO7C39/19(2006.01)

(56)对比文件

WO2021042057A1,2021.03.04审查员郝小燕

(43)申请公布日2022.05.13

(73)专利权人北京蓝晶微生物科技有限公司地址102206北京市昌平区中关村生命科

学园生命园路20号院4号楼1层

(72)发明人孙甜甜杜德尧李腾张浩千王高艳马瑞佳王玉珩

(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002

专利代理师张璐

(51)Int.CI.

CO7C37/70(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页

(54)发明名称

一种从微生物发酵产物中提取大麻萜酚的方法

(57)摘要

CN114478195B本发明涉及提取工艺领域，具体涉及一种从微生物发酵产物中提取大麻萜酚的方法。所述方法包括：S1、将合成大麻萜酚的微生物发酵料液经过滤获得菌体，对所获得的菌体进行乙醇提取，提取后去除菌体，并将去除菌体后的料液浓缩至乙醇体积浓度为40%~50%,得到含有大麻萜酚的浓缩提取液；S2、向上述浓缩提取液中加入正己烷进行萃取，分三层：S21、收集上层的正己烷相；S22、分离中间层物质并提高其乙醇浓度，加入正己烷萃取，分两层，收集上层的正己烷相。本发明从微生物发酵产物中分离得到了高纯度

CN114478195B

用。

CN114478195B权利要求书1/1页

2

1.一种提取大麻萜酚的方法，其特征在于，其包括如下步骤：

S1、将合成大麻萜酚的微生物发酵料液经过滤获得菌体，对所获得的菌体进行乙醇提取，提取后去除菌体，并将去除菌体后的料液浓缩至乙醇体积浓度为40%~50%,得到含有大麻萜酚的浓缩提取液；

S2、向上述浓缩提取液中加入正己烷进行萃取，分三层：

S21、收集上层的正己烷相；

S22、分离中间层物质并提高其乙醇体积浓度至66~70%,加入正己烷萃取，分两层，收集上层的正己烷相；

合并所有正己烷相。

2.根据权利要求1所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，在步骤S22中，通过向中间层物质中加入无水乙醇以提高乙醇浓度。

3.根据权利要求1所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，在步骤S22中，采用正己烷对分两层后的下层物质反复萃取三到五次，并收集所得正己烷相。

4.根据权利要求1所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，在步骤S2中，还包括S23:采用正己烷对分三层后的下层物质进行萃取，收集所得正己烷相，与其他步骤获得的正己烷相合并。

5.根据权利要求1所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，所述方法还包括：

S3、将合并获得的正己烷相浓缩，获得大麻萜酚粗浸膏，用甲醇溶解所述大麻萜酚粗浸膏，得到浓缩料液，利用液固色谱法分离获得所述浓缩料液中的大麻萜酚。

6.根据权利要求5所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，利用十八烷基硅烷键合硅胶分离所述浓缩料液，洗脱梯度具体为：用质量浓度为64%的甲醇水溶液等度洗脱1~2CV;用质量浓度为64%~89%的甲醇水溶液梯度洗脱6~7CV;用质量浓度为89%的甲醇水溶液等度洗脱3~5CV;收集含有大麻萜酚的组分，并进行浓缩，获得大麻萜酚样品。

7.根据权利要求5或6所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，所述方法还包括：

S4、将所述大麻萜酚样品用正己烷溶解后，进行重结晶，得到大麻萜酚晶体。

8.根据权利要求7所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，在步骤S3和步骤S4之间，对大麻萜酚样品进行脱色处理。

9.根据权利要求8所述的提取大麻萜酚的方法，其特征在于，使用硅胶柱对所述大麻萜酚进行脱色处理，通过湿法上样，并依次采用体积比为50:1,45:1,40:1,35:1,30:1,25:1,20:1的正己烷和乙酸乙酯的混合溶剂进行梯度洗脱，每个梯度洗脱1~3CV,收集45:1后的样品，而后进行浓缩。

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