细胞存活率测定 吖啶橙碘化丙啶（AOPI）染色法标准立项修订与发展报告.docxVIP

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《细胞存活率测定吖啶橙/碘化丙啶（AO/PI）染色法》标准立项与发展报告

EnglishTitle:StandardizationDevelopmentReporton“CellViabilityDetermination—AcridineOrange/PropidiumIodide(AO/PI)StainingMethod”

摘要

细胞存活率测定是生物医药、细胞治疗、生物制造及基础生命科学研究中的一项核心质量控制指标。随着以CAR-T、干细胞疗法等为代表的细胞治疗产业的迅猛发展，对细胞产品质量与安全性的要求达到了前所未有的高度。细胞存活率作为细胞产品放行与质控中最基础且关键的参数，其检测结果的准确性、可比性与可靠性直接关系到产品的有效性与临床安全性。然而，当前行业内对于AO/PI荧光染色法这一常用技术缺乏统一、规范的操作标准，导致不同实验室、不同生产机构间的检测数据存在差异，为行业监管、技术交流与产品评价带来了挑战。

本报告旨在系统阐述《细胞存活率测定吖啶橙/碘化丙啶（AO/PI）染色法》标准立项的背景、目的意义、技术范围与核心内容。报告详细分析了该标准制定的紧迫性与必要性，指出其对于规范检测操作、统一结果判读、提升行业整体质量控制水平、保障细胞治疗产品安全有效、以及支撑相关法规监管的重要价值。报告的核心技术内容部分，深入解读了AO/PI染色法的基本原理，并概述了标准将涵盖的术语定义、试剂与仪器要求、标准化操作步骤、结果计算方法及报告格式等关键环节。

本报告的结论认为，该标准的制定与实施将填补细胞存活率检测领域的一项关键标准空白，为产业链上下游提供权威、统一的技术依据，有力推动我国细胞治疗与生物医药产业向标准化、规范化、高质量发展迈进。

关键词：细胞存活率；吖啶橙/碘化丙啶染色；标准化；细胞治疗；质量控制；荧光检测；生物医药

Keywords:CellViability;AcridineOrange/PropidiumIodideStaining;Standardization;CellTherapy;QualityControl;FluorescenceDetection;Biomedicine

正文

1.立项背景与目的意义

细胞存活率测定是贯穿于细胞研究、规模化生产、产品质检及临床前研究全流程的一项基础且至关重要的测量活动。其在生物医药（如细胞治疗药物、疫苗生产）、生物制造（如工业微生物发酵）、以及基础生命科学研究中具有不可替代的应用价值。根据国家药品监督管理局发布的《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》等相关法规文件，细胞活率是细胞治疗产品必须严格监控的关键质量属性之一。

近年来，全球及中国细胞治疗领域经历了爆发式增长。据行业分析数据，中国已成为全球细胞治疗临床研究最活跃的地区之一。这种爆发式发展在带来革命性治疗希望的同时，也对支撑产业高质量发展的基础质量检测技术提出了更高要求。细胞存活率作为细胞治疗产品生产过程中在线监控、放行检验的核心指标，其检测方法的标准化已成为行业共识性需求。当前，尽管AO/PI双荧光染色法因其快速、直观、可区分活死细胞等优点而被广泛应用，但实验室间在染料浓度、染色时间、细胞处理流程、仪器参数设置及结果判读标准等方面存在较大差异，导致数据可比性差，难以满足严格的药品质量管理规范要求。

因此，立项制定《细胞存活率测定吖啶橙/碘化丙啶（AO/PI）染色法》标准具有深远的意义：

*统一行业技术规范：为行业内广泛使用的AO/PI染色法提供权威、统一的操作规程，减少因方法学差异导致的结果偏差。

*保障产品质量与安全：通过标准化检测，确保细胞治疗产品在生产和放行环节的存活率数据真实、可靠，为产品的安全性和有效性提供坚实的数据支撑，符合《中华人民共和国药品管理法》对药品质量控制的基本要求。

*提升监管与评价效率：为药品监管机构、第三方检测中心及行业内部质控提供一致的技术评价依据，提升监管效能和行业互认水平。

*促进产业技术创新与交流：夯实产业发展的技术基础，有利于上下游企业间的技术对接与合作，营造更加规范、健康的产业发展生态。

2.标准范围与主要技术内容

2.1标准范围

本标准旨在规范利用吖啶橙与碘化丙啶双荧光染料进行细胞存活率测定的方法学。其技术规定涵盖了从样品准备、染色到结果分析的全过程操作要点。本标准广泛适用于各类有核细胞的存活率检测，包括但不限于免疫细胞（如T细胞、NK细胞）、干细胞、肿瘤细胞系以及原代培养细胞等，在研发、生产、质控等场景中具有普适性。

2.2核心技术原理

标准所依据的AO/PI荧光染色法，其科学原理具有明确的特异性与可操作性：

*吖啶橙：作为一种膜渗透性染料，可以自由