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b2生物安全柜操作规程演讲人（创作者）：省院刀客特万

目录01.操作前准备07.应急情况处理03.物品摆放与操作规范05.操作结束后的清洁与关闭02.设备启动与运行参数确认04.实验操作中的安全注意事项06.日常维护与定期检测08.使用记录与归档管理

01操作前准备

操作前准备规范的操作前准备是保障B2生物安全柜（以下简称“安全柜”）有效运行和实验安全的基础，需从环境、设备及人员防护三方面同步落实。

环境与空间检查1.确认安全柜放置环境：需处于独立实验区域，远离门窗、空调出风口及人员频繁走动的通道，避免外界气流干扰。根据《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2008），安全柜与墙面的水平距离应≥30cm，顶部与天花板的垂直距离应≥50cm，确保散热和气流循环不受阻碍。

2.环境参数控制：实验室内温度需维持在20-26℃，相对湿度40%-60%。若环境湿度过高（如70%），可能导致安全柜内电气元件受潮；温度过低（如18℃）则可能影响部分实验试剂的稳定性，需提前开启空调调节至标准范围。

个人防护装备穿戴1.基础防护：操作人员需穿戴符合ISO16604标准的一次性防护服（连体式为佳），袖口需紧密贴合手腕；佩戴无粉乳胶手套（外层可叠加丁腈手套增强抗化性），手套需完全覆盖防护服袖口，避免皮肤暴露。

2.面部防护：需佩戴防雾护目镜（或面罩），确保视野清晰且无漏隙；若实验涉及高风险微生物（如BSL-3级），需额外佩戴N95及以上级别的口罩，确保呼吸防护到位。

实验物品预处理1.物品表面消毒：所有需放入安全柜的物品（如培养皿、移液管、试剂瓶等），需先在实验室台面用75%乙醇擦拭表面，作用3分钟后晾干，避免将外界污染物带入安全柜内。

2.物品分类摆放：按“清洁-使用-污染”分区原则，提前将未使用的试剂、耗材置于安全柜左侧（清洁区），正在使用的物品置于中间操作区，已污染的废弃物（如吸头、培养板）置于右侧污染区，减少交叉移动导致的气流扰动。

02设备启动与运行参数确认

设备启动与运行参数确认安全柜启动后需严格验证其运行状态，确保气流参数符合标准，这是保障生物安全的核心环节。

开机与预热1.依次开启安全柜电源总开关（通常位于柜体右侧下方）、风机开关（面板上“Fan”键），设备进入自检模式。B2型安全柜为全排型（不循环回风），自检时风机需运行3-5分钟，待内部气流稳定后再进行后续操作。

2.观察控制面板：确认显示屏无故障代码（如“FilterError”“FlowAlarm”），各指示灯（电源、风机、紫外灯）状态正常（绿色常亮）。

气流参数检测1.下降气流风速检测：使用热式风速仪（精度±0.01m/s），在安全柜操作台面上方15cm处、沿内壁均匀选取5个检测点（左前、左后、中间、右前、右后），每个点测量3次取平均值。B2型安全柜下降气流风速标准为0.38-0.53m/s，若任意一点风速低于0.38m/s，需立即关闭设备并联系专业人员检修。

2.流入气流风速检测：将风速仪探头置于安全柜前窗操作口（高度10-15cm），沿水平方向均匀选取3个点（左、中、右），测量流入气流风速。标准值为0.5-0.6m/s（不同品牌可能略有差异，需参照设备说明书），若低于0.5m/s，可能导致外界空气倒灌，污染柜内环境。

报警系统测试1.模拟异常触发：轻触控制面板上的“TestAlarm”键，或故意遮挡回风格栅（需快速恢复，避免影响气流），确认设备能立即发出声光报警（蜂鸣器+红色指示灯闪烁），并自动记录报警时间及类型（如“LowFlow”）。

2.复位测试：排除异常后（如移开遮挡物、调整前窗高度至标准位置20cm），按下“Reset”键，确认报警停止，设备恢复正常运行。

03物品摆放与操作规范

物品摆放与操作规范合理的物品摆放是维持安全柜气流稳定、降低交叉污染风险的关键，需严格遵循“最小干扰”原则。

基础摆放要求1.避免遮挡关键区域：所有物品（包括设备、容器）与安全柜后壁的距离应≥10cm，与两侧内壁的距离≥5cm，禁止覆盖回风格栅（通常位于后壁下方）或遮挡顶部的送风格栅（位于操作区上方），否则会破坏气流平衡，导致局部涡流。

2.高度限制：柜内物品叠放高度不得超过操作台面以上20cm（以不遮挡操作者视线且不影响下降气流为准），过高的物品会阻碍下降气流，降低对操作者的保护效果。

分区操作管理1.清洁区与污染区分离：未开封的试剂、无菌耗材放置于左侧（远离操作者身体），已使用的移液管、培养板等污染物品放置于右侧，中间区域为主要操作区。操作时遵循“从左到右”的移动顺序，避免清洁物品接触污染区域。

2.锐器与非锐器分置：若涉及针头、玻片等锐器，需单独放置于防刺破的专用容器（如硬质塑料盒）中，容器需固定在操作台面右侧，避免倾倒或滑动。