3.1 重组DNA技术的工具 课件 高中生物新人教版选择性必修3（2022_2023学年）.pptxVIP

第三章——基因工程;番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。;1.基因工程的概念：;2.图解“基因工程实质”;3.基因工程诞生的理论基础;来源：;1’;;EcoRI

(在G与A之间切割);（1）该DNA片段上EcoRI的识别序列在哪儿？

（2）请用剪刀模拟EcoRI的识别序列和切割位点将目的基因“切割”下来。;1.请结合限制酶的作用特点，回答以下问题：

(1)限制酶能切开RNA分子的磷酸二酯键吗？;2.请写出下列限制酶切割形成的黏性末端，并思考同种限制酶切割产生的黏性末端是否相同？不同限制酶切割产生的黏性末端是否一定不同？;3.请判断：以下黏性末端是由种限制酶作用产生的。;什么样的末端才能连接起来？，;磷酸二酯键;DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？为什么？;4.几种相关酶的比较;1.根据所学知识，完成以下填空：

①限制酶②解旋酶③DNA连接酶④DNA聚合酶⑤RNA聚合酶;2.(2022·天津耀华中学高二期中)以下是几种不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是;3.DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是

A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键

B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键

C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键

D.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端;质粒;①能在受体细胞中稳定保存并复制

②有一个至多个限制酶切割位点，便于插入（携带）目的基因

③具有标记基因，便于筛查含有重组DNA分子的细胞

④对受体细胞无害、易分离;标记基因的筛选原理

载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力。将含有某抗生素抗性基因的载体导入受体细胞，抗性基因在受体细胞内表达，受体细胞对该抗生素产生抗性。在含有该抗生素的培养基上，能够生存的是被导入了载体的受体细胞。如图所示：;5’...................pBI121................GAATTC........3’

3’...................质粒................CTTAAG........5’;探究?活动三、重组DNA分子的模拟操作;4.下列关于基因运输工具——载体，必须具备的条件之一及理由均正确的是

A.能够复制，以便目的基因插入其中

B.具有多个限制酶切割位点，便于目的基因的表达

C.具有某些标记基因，便于重组DNA的筛选

D.对受体细胞无害，便于重组DNA的筛选;5.某细菌质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转入成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，如图所示是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)示意图，请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是;6.图甲是含有目的基因的外源DNA片段，图乙是用于将目的基因导入受体细胞的质粒（阴影部分表示抗生素抗性基因），相关限制酶的作用部位如图所示，现欲培养转基因抗病植株，回答下列问题。;（3）由于反应体系中含有大量的外源DNA片段和质粒，加入PstI一种限制酶后，会得到大量的目的基因片段和质粒片段，再加入DNA连接酶后，除了会形成目的基因与质粒连接的环状产物外，还会形成______________________连接的环状产物以及_____________________连接的环状产物。此外，目的基因与质粒的连接既可以是正向连接，也可以是____________，后者可能会导致目的基因无法正常表达。;