CN115074289A 一种培养细菌新物种的培养基制作方法 （浙江大学杭州国际科创中心）.docxVIP

(19)国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN115074289A(43)申请公布日2022.09.20

(21)申请号202210786975.6

(22)申请日2022.07.04

(71)申请人浙江大学杭州国际科创中心

地址310000浙江省杭州市萧山区市心北

路99号5楼

(72)发明人马斌余静文

(74)专利代理机构长沙都创云天知识产权代理事务所(普通合伙)43274

专利代理师夏轩

(51)Int.CI.

C12N1/20(2006.01)

C12N1/38(2006.01)

权利要求书2页说明书6页附图1页

(54)发明名称

一种培养细菌新物种的培养基制作方法

(57)摘要

CN115074289A本发明涉及微生物领域，尤其涉及一种培养细菌新物种的培养基制作方法，所述方法基于微生物初始资源库，获得生物因子，用以培养细菌；基于高通量测序方法，获得微生物群落结构特征，并基于所述微生群落结构特征和所述生物因子，配置目标培养基；基于所述目标培养基，培养活性单细胞，获得新物种菌落。本发明通过在培养基中增加了微生物生长所需的生物因子，提高了培养效率；避免了传统培养方法中富养条件对微生物的选择和共培养中微生物竞争造成的物种多样性损失；通过高通量测序数据指导培养基的配制，结合微生物信息学和培养组学，提高了

CN115074289A

基于微生物初始资源库，获得生物因子，用以培养细菌

基于微生物初始资源库，获得生物因子，用以培养细菌

基于高通量测序方法，获得微生物群落结构特征，并基于所述微生群落结构特征和所述生物因子，配置目标培养基

基于所述目标培养基，培养活性单细胞，获得新物种菌落

S10

S20

S30

CN115074289A权利要求书1/2页

2

1.一种培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述方法包括：

基于微生物初始资源库，获得生物因子，用以培养细菌；

基于高通量测序方法，获得微生物群落结构特征，并基于所述微生群落结构特征和所述生物因子，配置目标培养基；

基于所述目标培养基，培养活性单细胞，获得新物种菌落。

2.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述基于微生物初始资源库，获得生物因子，用以培养细菌，包括：

基于微生物初始资源库，获取已知细菌；

基于液体培养基，培养所述已知细菌，并在对数期结束培养，获得培养液；

过滤所述培养液中的所述已知细菌，获得所述生物因子，用以培养细菌。

3.根据权利要求2所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述生物因子包括代谢物、分泌物和酶。

4.根据权利要求2所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述过滤所述培养液中的所述已知细菌，获得所述生物因子，包括：

用孔径小于0.22um的无菌滤膜过滤所述培养液中的所述已知细菌，获得所述生物因子。

5.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述基于所述微生群落结构特征和所述生物因子，配置目标培养基，包括：

基于所述微生物群落结构特征，确定所述生物因子的配置比例；

基于所述配置比例，配置所述生物因子；

稀释所述生物因子，获得目标培养基，以培养所述活性单细胞。

6.根据权利要求1所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述基于所述目标培养基，培养活性单细胞，获得新物种菌落，包括：

基于流式细胞仪和细胞培养板，对所述活性单细胞进行分选，获得分选细胞板；

在所述分选细胞板的培养仓中加入所述目标培养基，并基于半透膜，对所述培养仓进行分隔密封；

基于预设培养参数，将所述分选细胞板放入恒温恒湿培养箱中进行培养，以获得所述新物种菌落。

7.根据权利要求6所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述基于预设培养参数，将所述分选细胞板放入恒温恒湿培养箱中进行培养，以获得所述新物种菌落，包括：

基于预设培养时长，获取所述细胞培养板中的可见菌落；

通过对所述可见菌落的接种培养和纯化，获得所述新物种菌落。

8.根据权利要求6所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于，所述基于流式细胞仪和细胞培养板，对所述活性单细胞进行分选，包括：

基于流式细胞仪的荧光分选能力，筛选待选微生物中的所述活性单细胞；

基于所述流式细胞仪，将所述活性单细胞分选至所述细胞培养板的培养仓中。

9.根据权利要求6所述的培养细菌新物种的培养基制作方法，其特征在于