《临床检验技术》课件——网织红细胞计数.pptxVIP

临床检验基础

网织红细胞计数

红细胞的发育过程造血干细胞红系祖细胞原始红细胞早幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞网织红细胞成熟红细胞网织红细胞成熟48小时，红细胞存活月120天

网织红细胞计数网织红细胞（Ret）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，其胞质中尚残留部分嗜碱性物质（核糖体和核糖核酸），可被某些染料活体染色后呈蓝色或紫色的网状或颗粒状结构，故名为网织红细胞。Ret体积略大于成熟红细胞（直径8.0～9.5μm），仍具有合成血红蛋白的能力，约1～2天后，过渡为成熟红细胞。ICSH将网织红细胞分成I～IV型。I型（丝球型）Ⅱ型（网型）III型（破网型）Ⅳ型（点粒型）

网织红细胞计数分型形态特征正常存在部位I型(丝球型)RBC几乎被网织物充满仅存在于正常骨髓II型（网型）位于RBC中央线团样结构松散大量存在于骨髓，极少见于外周血中III型(破网型）网状结构稀少，呈不规则枝点状排列少量存在于外周血中IV型(点粒型）嗜碱性物质少，呈分散的细颗粒、短丝状主要存在于外周血中网织红细胞类型及特征

网织红细胞计数

试管法原理网织红细胞内带负电荷的RNA磷酸基，与新亚甲蓝、灿烂甲酚兰等碱性染料带正电荷的有色反应基团结合，使RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩，形成蓝色的点状、线状或网状结构，显微镜下计数可得网织红细胞的相对值（%）和绝对值（×109/L）

试管法试剂10g/L煌焦油蓝或新亚甲蓝染液。简要操作染液与待检血液1︰1混合→室温放置10～15分钟→制备血涂片→低倍镜下观察→油镜计数→计算。

玻片法原理同试管法试剂10g/L煌焦油蓝乙醇溶液简要操作滴加染液于玻片上→待干→加同体积待检血液→充分混匀，染色→制备血涂片低倍镜下观察→油镜计数→计算。

Miller窥盘法Miller窥盘为圆形玻片，玻片上刻有两个正方形格子，计数时用小方格A计数红细胞，用大方格B（包含A）计数网织红细胞，大方格B（包含A）面积为小方格A的9倍。ICSH及我国卫计委临床检验中心推荐使用Miller窥盘进行网织红细胞计数。BA

结果计算网织红细胞比例=计数1000个红细胞中的网织红细胞10001.直接观察法2.窥盘计数法网织红细胞比例=大方格内网织红细胞数小方格内红细胞数×93.网织红细胞绝对数（个/L）=网织红细胞百分数×红细胞数/L4.网织红细胞生成指数（RPI）RPI=网织红细胞百分数×患者血细胞比容20.45

网织红细胞计数黄焦油兰染色的网织红细胞

仪器法带网织红细胞计数参数的血液分析仪、流式细胞仪（FCM）和网织红细胞专用计数仪均可，网织红细胞中RNA经特殊荧光染料染色可进行RNA定量，能精确计数网织红细胞占红细胞的百分数（Ret%）。

网织红细胞计数网织红细胞可分为低荧光强度网织红细胞（LFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）以及高荧光强度网织红细胞（HFR）。还可计算未成熟网织红细胞（IMR）和网织红细胞成熟指数（RMI）。

方法分类Ret计数方法手工法试管法玻片法Miller法仪器法FCM、BCA试管法和玻片法原理、试剂基本相同，均可使用米勒窥盘，方便计数提高效率

网织红细胞计数及时检测1把握好染色过程3选择合适的染料2选择好计数部位4注意事项

方法学评价计数方法评价普通显微镜法简便、成本低，可直观细胞形态；但影响因素多，重复性差玻片法水分易蒸发，染色时间短，结果偏低试管法易掌握，重复性较好，易复查Mille窥盘计数法规范计算区域，减少了实验误差（CV值在10%左右），为ICSH推荐方法血液分析仪法检测细胞多，精密度高，与手工法相关性好，易标准化，但仪器贵，在出现H-J小体、有核红细胞、巨大血小板时结果常假性增高

参考区间

临床意义（一）增加（二）减少（三）RPI表示骨髓造血功能旺盛，见于各类增生性贫血、疗效观察等常见于骨髓增生受抑制、再生障碍性贫血和纯红细胞再生障碍RPI3时，提示溶血性贫血或急性失血性贫血RPI2时，则提示红细胞生成减少所致的贫血

习题1.显微镜法网织红细胞数常用染料是A.瑞氏染液B.结晶紫-沙黄C.H-E染液D.煌焦油蓝E.苏丹Ⅲ2.关于网织红细胞计数的叙述，错误的是A.常采用显微镜计数法B.在显微镜