CN114778831A 一种基于双抗夹心法的抗原检测胶体金分段半定量检测试纸的制作方法 （国科温州研究院(温州生物材料与工程研究所)）.docxVIP

(19)国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN114778831A(43)申请公布日2022.07.22

(21)申请号202210490629.3

(22)申请日2022.05.07

(71)申请人国科温州研究院(温州生物材料与工程研究所)

地址325001浙江省温州市龙湾区永中街

道金联路1号

(72)发明人陈浩满史依李家和李钰杭

陈钒萱韦超祎俞彗静雷宇静

王若云邓萍王优阮煜闻

周环玲焦蕊张嘉琪苏菲菲钱秋萍胡孝渠周凯潘景业周云龙帅建伟

(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569专利代理师苏士莹

(51)Int.CI.

G01N33/558(2006.01)

G01N33/58(2006.01)GO1N33/569(2006.01)

G01N33/543(2006.01)

权利要求书1页说明书5页附图1页

(54)发明名称

一种基于双抗夹心法的抗原检测胶体金分段半定量检测试纸的制作方法

(57)摘要

CN114778831A本发明提供了一种基于双抗夹心法的抗原检测胶体金分段半定量检测试纸的制作方法，涉及胶体金检测技术领域。本发明将胶体金免疫层析法发展为肉眼直接可读的半定量多段检测，并保留了传统胶体金试纸的优点。通过多条检测线的检测手段达到半定量检测的目的，制得一种新式能够分段显示被检测物的浓度范围的胶体金试纸检测工具，适用于疾病早筛和动态评估，同时也可以在其他非医学场景中应用，例如农药检测、食品安全检测和水物质检测。以医学为例，制备好的试纸在滴加患者的一滴血液后其分段式的颜色反应结果可用于快速检测血清学指标，便

CN114778831A

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CN114778831A权利要求书1/1页

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1.一种基于双抗夹心法的抗原检测胶体金分段半定量检测试纸，其特征在于，所述胶体金试纸条上包括依次粘贴在PVC板上的样品垫、一抗Ab1包被的胶体金垫、一抗Ab2包被后的硝酸纤维素膜、二抗包被后的硝酸纤维素膜和吸水滤纸；所述包被后的硝酸纤维素膜包含多条检测线和一条质控线；每条所述检测线上包被相同浓度或不同浓度的一抗Ab2;质控线上包被二抗；其中一抗Ab1和一抗Ab2是针对同一抗原的不同抗体决定簇。

2.根据权利要求1所述胶体金试纸条，其特征在于，所述二抗与一抗Ab1能够结合。

3.根据权利要求1所述胶体金试纸条，其特征在于，在所述PVC底板中央粘贴包被后的硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上缘粘贴吸水滤纸，硝酸纤维素膜下缘粘贴抗体胶体金垫，胶体金垫下缘粘贴样品垫。

4.根据权利要求1所述胶体金试纸条，其特征在于，所述每条检测线上包被的一抗Ab2的量与待测物质的分段浓度相对应；所述抗原包括所有大分子和细胞，例如：谷草转氨酶、谷丙转氨酶、血红蛋白、人血清白蛋白、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞。

5.根据权利要求4所述胶体金试纸条，其特征在于，在所述胶体金试纸条上的硝酸纤维素膜上设置3条检测线；当所述抗原为CD4+T细胞时，3条检测线上，检测线T1上喷涂1～4mg/mL的抗CD4+T细胞抗体Ab2溶液2.0μL,检测线T2上喷涂1～4mg/mL的抗CD4+T细胞抗体Ab2溶液2.0μL,检测线T3上喷涂1～4mg/mL的抗CD4+T细胞抗体Ab2溶液4.0μL。

6.一种基于双抗夹心法的抗原检测胶体金分段半定量检测试纸，其特征在于，包括权利要求1～5任一项所述胶体金试纸条。

7.根据权利要求6所述分段半定量检测体系，其特征在于，当只有质控线C显示为红紫色时，CD4+T细胞浓度为(0,12.5×10?/L),当质控线C与T1同时显示为红紫色时，CD4+T细胞浓度区间为(12.5×10?/L,25×10?/L);当质控线C与T1、T2同时显示为红紫色时，CD4+T细胞浓度区间为[25×10?/L,50×10?/L];当质控线C线与三条T线显示为红紫色时，CD4+T细胞浓度区间为(50×10?/L,+∞)。

8.根据权利要求7所述分段半定量检测体系，其特征在于，当只有质控线C显示红紫色时，结果其对应一阶段浓度；当质控线C与T1同时显示为红紫色其结果对应二阶段浓度；当质控线C与T1、T2时显示为红紫色时，其结果对应三阶段浓度；当质控线C与三条T线同时显示为红紫色其结果对应四阶段浓度；当质控线C不显色时则试纸